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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

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平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(PRM) 代做服務(wù)

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更新時(shí)間:2025-01-02 18:34:46瀏覽次數(shù):3114次

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產(chǎn)地類別 國產(chǎn) 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
提供商: 上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱: 平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(PRM) 實(shí)驗(yàn)服務(wù)
服務(wù): 1-2周
規(guī)格: 實(shí)驗(yàn)服務(wù)
價(jià)格: 500元
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(PRM) :

PRM是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)視技術(shù),能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)、目標(biāo)肽段(如發(fā)生翻譯后修飾的肽段)進(jìn)行選擇性檢測,從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行定量。PRM技術(shù)基于Q-Orbitrap為代表的高分辨、高精度質(zhì)譜平臺,首先

利用四級桿質(zhì)量分析器的選擇能力,用Q1選擇目標(biāo)肽段的母離子,隨后在Collision cell中對母離子進(jìn)行碎裂,后利用Orbitrap分析器在二級質(zhì)譜中檢測所選擇的母離子窗口內(nèi)的所有碎片信息。這樣即可對復(fù)雜樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行準(zhǔn)確地特異性分析。

實(shí)驗(yàn)意義:

PRM技術(shù)是針對無抗體蛋白的驗(yàn)證新技術(shù),用于label free, iTRAQ, TMT, SILAC等相對定量蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)的驗(yàn)證,或?qū)?fù)雜樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行靶向定量分析。

實(shí)驗(yàn)步驟:

用PRM進(jìn)行蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)驗(yàn)證的一般步驟為:

 

結(jié)果展示

 

實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn):

1.實(shí)驗(yàn)周期: --般PRM時(shí)間為: 5-10天

2.交付標(biāo)準(zhǔn):

組學(xué)驗(yàn)證:

①主要儀器、試劑和實(shí)驗(yàn)方法。

②PRM目標(biāo)離子信息:肽段序列和定量子離子。

③方法學(xué)重復(fù)性評價(jià):三次技術(shù)重復(fù)的色譜峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) (預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果) 。

④實(shí)驗(yàn)結(jié)果:二級圖譜,XIC圖譜,原始峰面積強(qiáng)度值,矯正后的相對表達(dá)量,兩組樣本間的相對比值,ttest p值。

相對/定量:

①主要儀器、試劑和實(shí)驗(yàn)方法。

②PRM目標(biāo)離子信息:肽段序列和定量子離子。

③方法學(xué)評價(jià):相對定量的重復(fù)性評價(jià)-測試樣本的三次技術(shù)重復(fù)的色譜峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) (預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果) ;

定量的方法學(xué)評價(jià)-標(biāo)準(zhǔn)品XIC圖譜,LOD, LOQ,線性范圍, 6個(gè)稀釋梯度得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性公式(每個(gè)稀釋度有3次技術(shù)重復(fù))。

④實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

相對定量:二級圖譜,XIC圖譜,原始峰面積強(qiáng)度值,矯正后的相對表達(dá)量,兩組樣本間的相對比值,ttest p值。

定量:二級圖譜,XIC圖譜,原始峰面積強(qiáng)度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的蛋白質(zhì)濃度值,兩組樣本間的相對比值,ttest p值。

需確認(rèn)的信息:

1.樣品:

①如果樣品為蛋白質(zhì)溶液,蛋白質(zhì)總量≥300mg;

②如果是組織樣品,樣品總量≥0.1g;如果是細(xì)胞樣品,細(xì)胞數(shù)量≥107個(gè);

③如果是體液樣品,血清≥200ml,腦脊液≥200ml, 尿液≥1ml,淚液≥1ml。

2.樣品采集過程中使用到塑料制品時(shí),盡量使用無色進(jìn)口產(chǎn)品,以減少塑料制品中雜質(zhì)對質(zhì)譜檢測的影響。

文獻(xiàn)參考

[1] Navin Rauniyar. Parallel Reaction Monitoring: A Targeted Experiment Performed Using High Resolution and HighMass Accuracy Mass Spectrometry. IntJ Mol Sci. 2015 Dec; 16(12): 28566- -28581.

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

 

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測

細(xì)胞增殖

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測序

動物實(shí)驗(yàn)

Taqman探針

ATP/ADP檢測

 

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細(xì)胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)

平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(PRM) 代做服務(wù)

提供商: 上海研謹(jǐn)生物$r$n服務(wù)名稱:

SILAC代謝標(biāo)記定量實(shí)驗(yàn)服務(wù)

提供商: 上海研謹(jǐn)生物$r$n服務(wù)名稱:

蛋白雙向2D-WB電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

提供商: 上海研謹(jǐn)生物$r$n服務(wù)名稱:

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