胎牛血清（FBS）的基礎(chǔ)知識(shí)與提取方法！

一、什么是胎牛血清（FBS）？

胎牛血清（FBS）是指通過封閉的采集系統(tǒng)從牛胎兒的血液中提取的血清。血清又是什么呢？血清是血液自然凝結(jié)后剩下的琥珀色血液部分；通常通過離心進(jìn)一步精制，以去除殘留的血細(xì)胞。不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對(duì)細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。

二、胎牛血清可以用在哪里？

胎牛血清（FBS）用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長補(bǔ)充劑 。動(dòng)物血清（牛血清和其它動(dòng)物血清）都用于細(xì)胞培養(yǎng)，其中使用泛的是胎牛血清（FBS）。 FBS含有生長因子和極低水平的抗體，因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分，包括蛋白質(zhì)，電解質(zhì)，脂質(zhì)，碳水化合物，激素，酶和其他不確定的成分，這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長都是必需的。

制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清（FBS）進(jìn)行調(diào)查，包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn)，疫苗制造，克隆和動(dòng)物診斷。

胎牛血清能夠用在人獸疫苗及生物技術(shù)藥物的科研、工業(yè)生產(chǎn)和質(zhì)量控制領(lǐng)域。胎牛血清通常用于人源細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)。

三、胎牛血清的優(yōu)點(diǎn)是什么？

與其它類型血清相比，胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長因子，及較少的gamma球蛋白含量。此外，跟新生動(dòng)物血清和成體動(dòng)物血清相比，胚胎期血清含有更低濃度的補(bǔ)體。補(bǔ)體具有溶解細(xì)胞的副作用，還會(huì)干擾免疫檢測(cè)。

四、胎牛血清的來源地是哪里？

胎牛血清的主要來源地就是那些大量養(yǎng)牛的國家，包括美國、澳大利亞、新西蘭、加拿大及南美和中美洲地區(qū)，由政府機(jī)構(gòu)管理血清制品的生產(chǎn)及收集過程。 胎牛血清分為美國（USDA）級(jí)和歐盟級(jí)。其中，美國級(jí)胎牛血清沒有瘋牛病（BSE）及口蹄疫（FMD）污染，能夠出口到任何國家，而歐盟級(jí)胎牛血清只在大部分歐洲國家及亞洲國家銷售。

五、如何保存胎牛血清？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存，2°到8°之間融化。一個(gè)比較好的辦法是，將胎牛血清分裝到50ml管中，這樣做就避免了反復(fù)凍融對(duì)血清造成的危害。偶爾一些試管等分的血清在冷凍溫度下保持液態(tài)。 這是由于缺少成核中心，就是一些引發(fā)結(jié)晶（冷凍）的顆粒物質(zhì)。只需用手指輕彈管子，它們就會(huì)立即固化。 血清融化后常出現(xiàn)沉淀，可能是血清蛋白變性造成的。簡(jiǎn)短離心即可除去沉淀，并且，這些沉淀一般不會(huì)影響血清質(zhì)量的。

六、胎牛血清的提取方法和流程

胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛，胎牛血清是高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少?，F(xiàn)有的胎牛血清制備工藝復(fù)雜、成本高，且純度低，不利于體外細(xì)胞培養(yǎng)。

1)將懷孕9個(gè)月的母牛進(jìn)行剖腹產(chǎn)，產(chǎn)前采用側(cè)臥，剖腹產(chǎn)前進(jìn)行局部麻醉；

2)手術(shù)切口位置選擇在左腋窩腹壁的五分之二處，切口長為30cm；

3)胎牛拉出子宮后,在潔凈室的層流罩下對(duì)胎牛進(jìn)行心臟穿刺采血，心臟穿刺采血時(shí)采用消毒后的采血針，采血部位為胎牛的心臟，采血后立即將采集的血液輸入帶蓋瓶體，帶蓋瓶體的瓶蓋中部具有用于采血針穿過的小孔，待將采集的血液輸入瓶體后，將帶有采血針孔的瓶蓋更換為密封瓶蓋；

4)將步驟3)中的帶蓋瓶體放入冷凍離心機(jī)中，以3800轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心35分鐘，析出的血清收集進(jìn)已經(jīng)過殺菌的容器內(nèi)進(jìn)行保存；

5)將步驟4)中的血清在凈化車間進(jìn)行解凍，解凍溫度為恒溫27°；

6)對(duì)步驟5)中化開的血清進(jìn)行過濾，從上到下依次三層微孔過濾膜進(jìn)行3次過濾，過濾孔徑依次為0.1μm。即得胎牛血清。

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