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您現(xiàn)在的位置: 上海語純生物科技有限公司>>感受態(tài)>>根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)>> CC96305GV3101(pSoup)感受態(tài)
CC96305GV3101(pSoup)感受態(tài)
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • CC96305 產(chǎn)品型號
  • 語純生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):58更新時間:2025-04-24 10:10:58

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10 ×100ul/100×100ul
貨號 CC96305 應用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
GV3101(pSoup)感受態(tài)
產(chǎn)品貨號:CC96305
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹

GV3101(pSoup)感受態(tài)

產(chǎn)品簡介
GV3101(pSoup)菌株為 C58 型背景,核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因 Rif,為了便于轉(zhuǎn)
化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90 (pTiC58DT-DNA),此質(zhì)粒含有
vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T
DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T-DNA 順利轉(zhuǎn)移)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)
Ti 質(zhì)粒含有篩選標簽:Gent,賦予 GV3101 菌株慶大霉素抗性;在 GV3101 菌株中轉(zhuǎn)入 help 質(zhì)粒:
pSoup 即為 GV3101(pSoup)菌株,可幫助 pGreen,62SK,pGs2 系列質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復制,同時賦
予該菌株四環(huán)素(Tet)抗性。適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生
產(chǎn)的 GV3101(pSoup)化學轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pGs2(卡那霉素抗性)質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率
≥ 10cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分 
GV3101pSoup
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μl
100 × 100 μl
定制
基因型:C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( GentRNopaline(pSoup-TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90 和 pSoup 質(zhì)粒外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥ 10cfu/μg DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μl 感受態(tài)細胞中,用手撥da管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮
分鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍)、37℃水浴 分鐘、冰浴 分鐘;
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時;
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB
平板上,倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 (當平板只含有 50 μg/ml Kan 時,28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可;平
板中同時加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 時,需 28 ℃培養(yǎng) 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 
需要 28 ℃培養(yǎng) 72-90 h。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10
3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl,利福平濃度過高不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。
4. 由于 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略),所以相關(guān)抗性基因可以不用添加。

GV3101(pSoup)感受態(tài)

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