摘要：磷酸果糖激酶(PFK)是一種激酶，在糖酵解過(guò)程中使6-磷酸果糖磷酸化。它屬于磷酸果糖激酶B（PfkB）家族。該家族的其他成員（也被稱(chēng)為核糖激酶家族）包括核糖激酶（RK）、腺苷激酶（AK）、和1-磷酸果糖激酶。PfkB/RK家族的成員通過(guò)存在三個(gè)保守的序列圖案來(lái)識(shí)別。幾個(gè)PfK家族蛋白的結(jié)構(gòu)已經(jīng)從一些生物體中確定，這個(gè)家族蛋白的酶活性顯示出對(duì)五價(jià)離子存在的依賴(lài)性。它在骨骼?。≒FKM）、肝臟（PFKL）和血小板（PFKP）中都有異構(gòu)體版本，允許特定組織的表達(dá)和功能。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。

4.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

植物磷酸果糖激酶(PFK)ELISA檢測(cè)試劑盒組成及其配置：

加樣注意事項(xiàng)：

1.     加樣前：溶液應(yīng)充分混勻。加樣時(shí)避免90度向孔中滴加液體，否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留再吸頭上，從而導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。正確的加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

2.     加樣時(shí)：避免速度過(guò)快，否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性；避免液體濺出；

3.     加樣品時(shí)：?jiǎn)慰子昧恳螅骸?0微升/指標(biāo)，如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100微升/指標(biāo)。

4.     每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。

5.     如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠，不能用槍吸出再加，做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。

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