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貨物所在地：上海上海市
更新時間：2024-12-16 21:00:08
有效期：2024年12月16日 -- 2025年6月16日
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細胞增殖是指細胞在周期調控因子的作用下，通過DNA復制、RNA轉錄和蛋白質合成等復雜反應而進行的分裂系列過程。其中核DNA的復制倍增是整個過程的重要特征。細胞增殖檢測技術廣泛應用于分子生物學遺傳學腫瘤生物學免疫學藥理和藥代動力學等研究領域。
檢測細胞存活與增殖的方法主要包括觀察DNA合成含量和檢測細胞代謝活性兩種，前者主要有Brdu、EDU檢測等，后者主要有MTT、CCK8等檢測，客戶可根據(jù)處理藥物數(shù)量等因素選擇合適的檢測方法。
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)
實驗步驟：
1.通常細胞增殖實驗96孔板每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小、細胞增殖速度的快慢等因素決定)。按照實驗需要，進行培養(yǎng)并給予siRNA干擾。
2. 干擾24h-48h后，每孔加入10微升CCK-8溶液。如果起始的培養(yǎng)體積為200微升，則需加入20微升CCK-8溶液，其它情況以此類推?？梢杂眉恿讼鄳考毎囵B(yǎng)液和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測，需設置加了相應量細胞培養(yǎng)液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。
3. 在細胞培養(yǎng)箱內繼續(xù)孵育0.5-4小時，對于大多數(shù)情況孵育1小時就可以了。時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，初次實驗時可以在0.5、1、2和4小時后分別用酶標儀檢測，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續(xù)實驗。
4. 在450nm測定吸光度。如無450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片?？梢允褂么笥?span style="font-family:calibri">600nm的波長，例如650nm，作為參考波長進行雙波長測定。
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