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所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。我們公司提供利用熒光定量PCR的方法對(duì)樣品中的基因表達(dá)情況進(jìn)行相對(duì)定量或定量分析的技術(shù)服務(wù)。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)

反硝化作用是造成土壤氮素?fù)p失的主耍途徑之一，不僅導(dǎo)致氮肥利用率降低，同時(shí)增加溫室氣體N₂O的排放量，破壞大氣臭氧層，加速氣候變暖，對(duì)環(huán)境產(chǎn) 生嚴(yán)重影響。亞硝酸還原酶基因（nirK、nirS）是反硝化過(guò)程中的關(guān)鍵功能基因，在反硝化過(guò)程中起著重要作用，而稻田反硝化過(guò)程所產(chǎn)生的N₂O是重要的溫室氣體，要深入探討水稻土反硝化基因與N₂O排放的關(guān)系，需要明確反硝化基因的豐度和表達(dá)特征，以及分離和鑒定上壤中的優(yōu)勢(shì)反硝化功能菌，才能為進(jìn)一步開(kāi)展節(jié)氮減排打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

由于土壤細(xì)菌體內(nèi)的反硝化功能基因不一定都表達(dá)，可提取和純化細(xì)菌的 RNA,通過(guò)反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化成cDNA,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)來(lái)研究土壤屮能表達(dá)的反硝化基因的微生物種類和數(shù)量。探討反硝化基因的表達(dá)與長(zhǎng)期施肥的內(nèi)在聯(lián)系及與N₂O釋放的耦合機(jī)制。

客戶需知：

1、請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料，或直接提供純化好的總RNA或DNA（大于5ug/樣本）。

2、詳細(xì)背景資料：DNA/RNA來(lái)源，豐度。

結(jié)果提供：

1、實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟，和相關(guān)數(shù)據(jù)。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線，擴(kuò)增曲線，溶解曲線。

3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）。

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毓秀生物科技（上海）有限公司

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