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組織芯片免疫組化染色是將多種組織以規(guī)則的微陣列方式排列于同一載體上，同時進(jìn)行相同指標(biāo)的免疫組化檢測。具有體積小, 標(biāo)本信息含量大 , 一次性實驗即可獲大量結(jié)果。實驗條件更易控制一致，減少批間批內(nèi)誤差，結(jié)果更準(zhǔn)確。節(jié)省試劑，節(jié)省人力物力等優(yōu)點。
組織芯片實驗流程：
切片脫蠟至水-抗原修復(fù)-3%的雙氧水處理-畫圈-血清封閉-一抗4℃過夜孵育-二抗室溫孵育-顯色-蘇木素染核-脫水、透明、封片-鏡檢
注意事項：
1)石蠟切片制片，組織取樣后應(yīng)立即放入固定液中，避免凍存;
2)冰凍切片制片應(yīng)取用新鮮組織，以免抗原丟失;
3)組織蠟塊可以保存很長時間，但是石蠟切片理論上不能超過半年。
組織芯片原理：
1.選取待研究的組織。現(xiàn)在人們利用組織芯片技術(shù)對人體各組織均有研究，包括肝臟，前列腺，心臟，乳房等等，據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，在大腦組織中的應(yīng)用最多。醫(yī)學(xué)上常選取一些病變器官進(jìn)行研究。根據(jù)制作方法來分，微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。
2.經(jīng)檢測后標(biāo)記出待研究的區(qū)域。組織微陣列的檢測儀主要是高性能顯微鏡、熒光顯微鏡或共聚焦熒光顯微鏡。適用的檢測技術(shù)有蘇木精—HE染色，免疫組織化學(xué)(IHC)染色，原位雜交(ISH)，熒光原位雜交(FISH），原位PCR，寡核苷酸啟動的原位DNA合成(PRINS)等。
3.使用組織芯片點樣儀將標(biāo)記好的組織按設(shè)計排列在空白蠟塊模上。首先要利用打孔機(jī)在已經(jīng)標(biāo)記好的靶位點上進(jìn)行打孔，將組織芯轉(zhuǎn)入蠟塊?？字?，重復(fù)操作可轉(zhuǎn)入上千個樣品組織芯。
4.使用切片機(jī)對陣列蠟塊進(jìn)行連續(xù)切片即獲得組織芯片。根據(jù)制作方法來分，微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。后者可以克服上述前者的多種缺陷(含醛基的化合物(可能損傷RNA或使目標(biāo)抗原結(jié)構(gòu)斷裂或破壞抗原——抗體結(jié)合位點，另外，石蠟包埋乙醇固定過的組織也無法避免RNA降解）。
組織芯片的出現(xiàn)，與基因芯片配合使用在尋找疾病基因中有很好的互補(bǔ)作用。在腫瘤研究中發(fā)揮著重要作用。將基因芯片篩選出的基因作成探針，再將探針與組織芯片中眾多的腫瘤組織進(jìn)行熒光原位雜交，尋找腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)因素。
