納他霉素

英文名稱 : Pimaricin

CAS : 7681-93-8

分子式 : C33H47NO13

分子量 : 665.73

儲存條件 : 2-8°C

純度 : ≥95% (HPLC)

說明:一種抗真菌的多烯類抗生素，靠特異性地結(jié)合麥角甾醇，抑制真菌生長。 不像制mei菌素和菲律賓霉素, 納他霉素不改變細(xì)胞膜的通透性。物理性質(zhì)：幾乎無臭無味，可含3mol的水，幾乎不溶于水，高級醇、醚、酯，微溶于甲醇，溶于冰醋酸和二甲苯亞 砜。對氧化劑和紫外線較為敏感。

慢病毒感染快速指南

1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板，約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔，不同細(xì)胞因為細(xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會不同，快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例，加入 500uL wan全培養(yǎng)基進行細(xì)胞培養(yǎng)。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒（接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時間不宜太長，否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選）。

3.加病毒量計算方法：（細(xì)胞數(shù)×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量見下表。同時加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，濃度為 10mg/mL Polybrene，細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL。

4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基，棄去培養(yǎng)基，每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。（注：如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%，請及時傳代培養(yǎng)）。

6.建議將 48 孔板細(xì)胞進行傳代，傳代 12 孔板，后繼續(xù)觀察熒光，根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細(xì)胞生長良好，感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。（注：100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值，因為可能會造成細(xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高，影響細(xì)胞狀態(tài)。