化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
一、人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-DELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱:人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-DELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃，六個月
檢測樣本種類:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D水平。用純化的人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D，再與HRP 標記的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白DSP-D濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品（240 pmol/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟
準備試劑，樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品，37℃反應(yīng)30分鐘
洗板5次，加入酶標試劑，37℃反應(yīng)30分鐘
洗板5次，加入顯色A、B,37℃顯色10分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
后計算
五、試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
六、注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
七．特別提醒
1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
化工儀器網(wǎng)