中文名稱

羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）

英文名字

MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit(Fluorometric)(48 assays)

供應(yīng)商

Epigentek

產(chǎn)品貨號

P-1037-48

產(chǎn)品報價

￥6160/48Assays

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產(chǎn)品新聞

背景資料

MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）提供了*化的緩沖液和試劑，運用熒光定量的方法，通過檢測微孔板上5-hmC的水平，以定量檢測全基因組的DNA羥甲基化水平.而沒有甲基化和未甲基化胞嘧啶的結(jié)合活性.本試劑盒與MethylFlash DNA羥甲基化定量試劑盒（熒光法）能夠 配合，用來同時定量檢測DNA的甲基化和羥甲基化水平.
關(guān)于5-hmC
5-hmC是近年來在動物組織中發(fā)現(xiàn)的，由胞嘧啶修飾而來.5-hmC在表觀遺傳學上的功能可能與5-甲基化胞嘧啶（5-mC）不同.盡管到現(xiàn)在為止還不確知其功能，有研究者猜測它在調(diào)控基因的表達與關(guān)閉過程中起著重要的作用.5-mC的發(fā)現(xiàn)讓我們不得不重新評估DNA甲基信息，也不得不監(jiān)測人類的健康組織和病理組織之間5-mC相對分布的差異.在Epigentek的MethylFlash技術(shù)之前，我們還沒有發(fā)現(xiàn)任何直接的常規(guī)方法來檢測5- hmC，以及區(qū)分5-hmC和5-mC.
5-hmC 和 5-mC的區(qū)別
時下常用的DNA甲基化分析方法包括限制內(nèi)切酶酶切和亞硫酸氫鹽或MeDIP介導的MS-PCR和測序，這些技術(shù)都不適合用來檢測5-hmC，因為它與5-mC事實上很難用這類方法區(qū)分開來.為了解決這個問題，Epigentek研制了MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）.本試劑盒提供了一種很經(jīng)濟的方法來檢測5-羥甲基化胞嘧啶，并且區(qū)分5-hmC， 5-mC， 和 C，使得研究者能夠重新評估他們的DNA甲基化信息，也能夠在新樣品中尋找DNA羥甲基化.本試劑盒有以下優(yōu)點和特性：
簡單易學方便快捷的熒光分析技術(shù).整個檢測過程只需要3小時20分鐘.
靈敏度高，檢測極限為10pg羥甲基化的DNA
高度的專一性，不與甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶結(jié)合.5-hmC被專一地堅持.試劑盒中還提供有適用于定量所有物種羥甲基化DNA的普遍陰性對照和陽性對照.
96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量.
簡單、可靠、檢測條件恒定.

產(chǎn)品描述

MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）中含有定量檢測全基因組羥甲基化所必需的所有試劑.在檢測實驗中，DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上，羥甲基化的片段會被捕獲劑以及檢測抗體識別，用熒光分光光度計讀取在ex=530 +/-20/em=580 +/-20 nm處的熒光強度來定量.羥甲基化的DNA的量與熒光強度值成線性關(guān)系，可以通過本試劑盒提供的方程來計算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對羥甲基化狀態(tài)或者通過標準曲線*定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式，本試劑盒可以用于各種物種來源的多種樣品形式，包括培養(yǎng)的細胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品.本試劑盒曾經(jīng)對來自小鼠大腦和海拉細胞系的樣品成功地進行了5-hmC的定量，所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當.通過使用本試劑盒，研究者們 在正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC.同時，研究結(jié)果還顯示，正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的總和）的32%和16%.相反，在結(jié)腸癌細胞系（HCT116）和宮頸癌細胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，幾乎沒有. 該羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括：HF1 （10X Wash Buffer） HF2 （Binding Solution） HF3 （Negative Control I， 20 ug/ml） HF4 （Negative Control II， 20 ug/ml） HF5 （Positive Control， 20 ug/ml） HF6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml HF7 （Detection Antibody， 400 ug/ml） HF8 （Enhancer Solution） HF9 （Fluoro Developer） HF10 （Fluoro Enhancer） HF11 （Fluoro Dilutor） 8-Well Assay Strips （With Frame） 用戶指南手冊