商品介紹：
糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和無活性的糖原磷酸化酶b（GPb）兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。

測(cè)定原理：

GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）時(shí)測(cè)定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）時(shí)測(cè)定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
測(cè)定操作表：

酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )1次  柱式酵母質(zhì)粒 DNAout50 次

96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )5次  柱式酵母 DNAout50 次

96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1次  柱式醬油 DNAout10 次

沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次  柱式海洋動(dòng)物 DNAout50 次

一站式柱式 miRNAout50 次  柱式骨骼 DNAout50 次

柱式凝固血液 DNAout50 次  一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次

FTA 血片 DNAout50 次  一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次

柱式凍存血液 DNAout50 次  一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝30 次

柱式凍存血液 DNAout250 次  一站式 DNA 非變性 PAGE 電泳套裝30 次

血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次  一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝30 次
BCIP/NBT顯色試劑盒

BCIP/NBT顯色試劑盒100ml

BCIP/NBT顯色試劑盒50ml

BL21DE3感受態(tài)細(xì)胞 20 x 100μl

b－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶NAG測(cè)試盒 50管/24樣 比色法
糖原磷酸化酶b（GPb）微量法測(cè)試盒AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL  Wortmannin(PI3K 抑制劑 )0.5mg

EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL  WGA 糖蛋白分離試劑盒10 次

GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL  Vinblastine( 長(zhǎng)春新堿 )100μL

LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL  UTP 溶液，2.5mM2mL

AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL  UTP 溶液，100mM0.25mL

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