DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
三0酸腺苷酶   英文名稱：   Adenosine iphosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ATP  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  16691-43-3  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S  度：98.0%   

三0酸脫氧核苷酸混合溶液   10x0.5ml  Amoxapine  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O  度：98.0%

三(羥甲基)基鹽酸鹽   100g  3-Amino-4-methylbenzamide  19406-86-1  中文名：3-氨基-4-甲酰胺  分子式：C8H10N2O  度：98.0%   

腮腺炎病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  1571-72-8  中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%   

瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液   Vascular permeability test solion  3-Amino-3-phenylpropionic acid  614-19-7  中文名：C9H11NO2  分子式：C9H11NO2  度：98.0%
N-乙酰-DL-甲硫  N-Acetyl-DL-mine  質(zhì)量規(guī)格：0.99 人α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA檢測試劑盒Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit 96T/48T

DL-高半胱  DL-Homocysteine   質(zhì)量規(guī)格：0.95 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit

間氟-DL-酪  m-Fluoro-DL-tyrosine   質(zhì)量規(guī)格：0.99 英文名稱RatFree-TestoteroneELISAKit大鼠游離睪同(Free-Testoterone)規(guī)格：96T/48T

鈣蛋白酶抑制劑I(進口)  Calpain Inhibitor I(ALLN)   質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進口 革蘭氏陽性細菌基因組DNA化試劑盒20

DL-丙氨酰-DL-丙  DL-Ala-DL-Ala  質(zhì)量規(guī)格：0.97 ELISAKitHBxAg人乙型肝炎病毒X抗原規(guī)格：48T/96T

DL-丙氨酰-DL-正纈  DL-Alanyl-DL-norvaline  質(zhì)量規(guī)格：0.99 小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MT-1 ELISA Kit

3-(1-萘基)-L-丙  3-(1-Naphthyl)-L-alanine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 96T/48T

Fmoc-3-(2-萘基）-D-丙  Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine  質(zhì)量規(guī)格：0.98 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 Human secretin receptor,SR ELISA Kit

L-瓜  L-Citrulline   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Fmoc-L-瓜  Fmoc-L-Citrulline  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒Ⅴ(FITC)組織冠狀病毒3C類（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性

熒光淬滅法定量檢測試劑盒

細胞冠狀病毒3C類（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性

體液人類巨細胞病毒（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法

血液人類巨細胞病毒（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))