AMV來(lái)源重組逆轉(zhuǎn)錄酶
本產(chǎn)品是來(lái)源于大腸桿菌表達(dá)的Avian Myeloblastosis Virus（AMV）的重組逆轉(zhuǎn)錄酶，酶活性高，能夠高靈敏度地檢測(cè)出RNA。
該酶在引物存在時(shí)，以單鏈RNA和單鏈DNA作為模板合成DNA。由于它具有解鏈活性和分解雙鏈RNA-DNA中RNA的RNase H活性，因此可以高效地進(jìn)行RT-PCR?？蓱?yīng)用于first strand cDNA合成、制備cDNA探

AMV來(lái)源重組逆轉(zhuǎn)錄酶

 

 

本產(chǎn)品是來(lái)源于大腸桿菌表達(dá)的Avian Myeloblastosis Virus（AMV）的重組逆轉(zhuǎn)錄酶，酶活性高，能夠高靈敏度地檢測(cè)出RNA。

該酶在引物存在時(shí)，以單鏈RNA和單鏈DNA作為模板合成DNA。由于它具有解鏈活性和分解雙鏈RNA-DNA中RNA的RNase H活性，因此可以高效地進(jìn)行RT-PCR?？蓱?yīng)用于first strand cDNA合成、制備cDNA探針、RT-PCR。

 

 

◆特點(diǎn)

 

●　高靈敏度檢測(cè)RNA

●　長(zhǎng)鏈RNA的逆轉(zhuǎn)錄

●　熱穩(wěn)定性高

●　GC-rich RNA的逆轉(zhuǎn)錄

 

 

◆應(yīng)用

 

●　RT-LAMP法

●　合成first strand cDNA

●　制備cDNA探針

●　應(yīng)用于RT-PCR

 

來(lái)源	Escherichia coli (Recombinant)
活性	20 units/μL
反應(yīng)溫度	42°C-65°C
單位定義	1 unit指以poly(A)/(dT)15為模板/底物，在37°C，10 min的條件下將1 nmol 　的脫氧核糖核苷酸攝入酸不溶性沉淀物中的活性
純度試驗(yàn)	DNase試驗(yàn)、RNase試驗(yàn)

 

 

◆產(chǎn)品組成

 

AMV Reverse Transcriptase （500 units）

 

組成內(nèi)容	包裝	儲(chǔ)存	備注
AMV Reverse Transcriptase  (20 units/μL)	500 units × 1	-20°C	200 mmol/L磷酸鈣（pH 7.2，25°C），  2 mmol/L DTT、0.2% Triton X-100,   50% Glycerol
5xAMV RT Reaction Buffer	1 mL× 1	-20°C	250 mmol/LTris-HCl（pH 8.5，25°C）、  150 mmol/LKCl, 40 mmol/L MgCl2

 

 

◆應(yīng)用實(shí)例

 

實(shí)驗(yàn)案例 Isothermal Master Mix合用（高靈敏檢測(cè)RNA）

 

用ISOGEN從感染瓜類褪綠黃化病毒（簡(jiǎn)稱CCYV）的蜜瓜葉中提取RNA，將提取的RNA溶液作為模板使用。用等溫基因擴(kuò)增試劑Isothermal Master Mix和一組引物擴(kuò)增目標(biāo)區(qū)域，然后用等溫?cái)U(kuò)增熒光檢測(cè)裝置Genie^® II檢測(cè)出了CCYV RNA。

 

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<反應(yīng)條件>

Isothermal Master Mix    15 μL

AMV RT                           0.25 units

引物                                 2.5 μL

模板RNA                          2 μL

 

反應(yīng)體積                          25 μL

擴(kuò)增：                             63°C 30 min

 

※ 檢測(cè)瓜類褪綠黃化病毒的引物為獨(dú)立行政法人農(nóng)業(yè)、食品產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究機(jī)構(gòu)九州沖繩農(nóng)業(yè)研究中心在推進(jìn)新農(nóng)林水產(chǎn)政策的實(shí)用

※ 技術(shù)開發(fā)產(chǎn)業(yè)“開發(fā)以粉虱為媒介的新型瓜類蔬菜病毒病的綜合性防治技術(shù)系統(tǒng)”中開發(fā)的產(chǎn)品。

 

 

結(jié)果

 

 

由于Isothermal Master Mix中含有的DNA聚合酶具有逆轉(zhuǎn)錄活性，即使不添加逆轉(zhuǎn)錄酶也能檢測(cè)出RNA，但通過(guò)添加本產(chǎn)品，可提高檢測(cè)速度。另外，模板RNA量為0.5 ng時(shí)也能使目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增（綠色實(shí)線）。

 

 

備注

 

本產(chǎn)品為實(shí)驗(yàn)研究用試劑。不可作為醫(yī)藥品使用。

 

 

◆產(chǎn)品列表

 

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
311-07501	AMV逆轉(zhuǎn)錄酶	500 units

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
316-08151	GeneAce Reverse Transcriptase	10,000 units
312-08153		10,000 units × 5
313-08161	M-MLV Reverse Transcriptase	10,000 units
319-08163		10,000 units × 5