重組胰蛋白酶（RTrypsin）
◆概述
胰蛋白酶（Trypsin; EC 3.4.21.4）是一種絲氨酸蛋白酶，酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由畢赤酵母重組表達(dá)并采用層析色譜法純化獲得。氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致，分子量為24 kDa，適pH為7.0-9.0。

重組胰蛋白酶（RTrypsin）

 

 

 

 

 

◆概述

 

胰蛋白酶（Trypsin; EC 3.4.21.4）是一種絲氨酸蛋白酶，酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由畢赤酵母重組表達(dá)并采用層析色譜法純化獲得。氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致，分子量為24 kDa，適pH為7.0-9.0。可替代豬胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中，如：重組胰島素生產(chǎn)；細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵；蛋白質(zhì)的酶解、測序；各種組織的細(xì)胞分離等。活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如TLCK、PMSF等的抑制，金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。

 

 

◆優(yōu)勢

 

●　批量生產(chǎn)規(guī)模大，批間小

●　高純度，高比活性

●　重組表達(dá)生產(chǎn)，無外源性病毒污染，生產(chǎn)過程不使用動物來源原料

 

 

◆純度

 

SDS-PAGE顯示純度＞95%。

 

 

◆來源

 

重組畢赤酵母菌株，其克隆有來自豬的胰腺來源陽離子型胰蛋白酶基因。

 

 

◆使用方法

 

保存：10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl2；溶解后分裝-15 ℃以下保存。

酶切體系：25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。

推薦使用量：蛋白酶：融合蛋白質(zhì)量比1：20~1：100（肽圖或蛋白組學(xué)研究），

推薦使用量：1：200~1：2000（多肽/蛋白生產(chǎn)工藝）。

 

 

◆保存條件

 

儲存穩(wěn)定性：凍干粉存于-15 ℃以下，24個月穩(wěn)定；10 mmol/L HCl，20 mmol/L CaCl₂溶解后分裝儲存于

儲存穩(wěn)定性：-15 ℃以下，反復(fù)凍融5次，未能觀察到活性損失；溶解后2~8 ℃保存建議不超過7 d。

運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定

 

 

◆應(yīng)用實(shí)例

 

RTrypsin特異性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點(diǎn)酶切產(chǎn)物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK，蛋白酶：合成多肽質(zhì)量比1：100，37 ℃酶切反應(yīng)10 min，LC-MS驗(yàn)證酶切反應(yīng)特異性。

 

 

Peak#	R.T.	M.W.	Sequence
Peak 1	6.70 min	366.42	YGK
Peak 2	7.61 min	552.6	YGKR
Peak 3	17.67 min	445.56	LWK
Peak 4	19.53 min	601.75	RLWK
Peak 5	19.97 min	950.15	YGKRLWK

 

 

◆產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	比活
RTP0102	RTrypsin	10 mg	3800 USP/mg
RTP0103	RTrypsin	1 mg	3800 USP/mg
RTP0104	RTrypsin	10 μg	3800 USP/mg

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	儲存溫度	其他信息
MDRK0101	重組胰蛋白酶檢測試劑盒	96 孔	2～8 ℃	檢測范圍 4.0～250 ng/mL
IRTP0101	固定化重組胰蛋白酶	1.0 mL	-15 ℃以下	1.0 mL含1.0 mg