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大鼠小腸黏膜上皮細胞呈柱狀,靠刮取結(jié)合酶消化獲取,經(jīng)特定培養(yǎng)。其能吸收營養(yǎng)、屏障防護、調(diào)節(jié)免疫,異常時關(guān)聯(lián)炎癥性腸病等腸道疾病 。
大鼠小腸黏膜上皮細胞
大鼠小腸黏膜上皮細胞作為小腸黏膜的重要組成部分,在營養(yǎng)物質(zhì)吸收、屏障保護及腸道免疫等方面承擔著關(guān)鍵職責,是維持小腸正常生理功能的核心細胞群體。
這類細胞呈現(xiàn)出典型的柱狀形態(tài),細胞排列緊密且規(guī)則,形成連續(xù)的單層上皮結(jié)構(gòu),覆蓋于小腸黏膜表面。其頂端細胞膜向外伸出大量密集的微絨毛,極大地增加了細胞表面積,為高效吸收營養(yǎng)物質(zhì)創(chuàng)造了有利條件。微絨毛表面還存在豐富的消化酶,如麥芽糖酶、肽酶等,能夠在營養(yǎng)物質(zhì)吸收前對其進行初步消化。細胞側(cè)面通過緊密連接、黏著連接和橋粒等結(jié)構(gòu)相互連接,構(gòu)建起一道堅固的物理屏障,有效阻止腸道內(nèi)有害物質(zhì),如細菌、毒素等進入機體內(nèi)部組織,保護機體免受侵害。
在實驗室中獲取該細胞,需要精細的操作流程。首先,將實驗大鼠處死后,迅速取出小腸組織,用預冷的生理鹽水反復沖洗,去除腸內(nèi)容物。隨后,采用機械刮取結(jié)合酶消化的方法。先用無菌刀片輕輕刮取小腸黏膜表面,收集刮取物,再利用胰dan白酶、膠原酶等消化酶對刮取物進行消化處理,使上皮細胞從組織碎片中分離出來。經(jīng)過過濾、離心等步驟進行細胞純化,最終得到較為純凈的小腸黏膜上皮細胞懸液。在細胞培養(yǎng)階段,需為其提供適宜的環(huán)境。一般選用含有多種營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,如添加了胎牛血清、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,以滿足細胞生長和代謝的需求。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫恒濕條件下,CO?用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,確保細胞能夠正常生長、增殖。
從生理功能角度看,該細胞在營養(yǎng)物質(zhì)吸收方面發(fā)揮著無可ti代的作用。通過主動運輸、被動運輸?shù)榷喾N方式,將葡萄糖、氨基酸、脂肪酸、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)運進入細胞內(nèi),再進一步轉(zhuǎn)運至組織液,為機體提供能量和構(gòu)建物質(zhì)。同時,作為腸道黏膜屏障的重要組成部分,上皮細胞不僅在物理層面阻擋病原體入侵,還通過分泌黏液、抗菌肽等物質(zhì),在化學層面抑制病原體生長繁殖。此外,小腸黏膜上皮細胞還參與腸道免疫調(diào)節(jié),與腸道內(nèi)的免疫細胞相互作用,識別和處理抗原,啟動免疫應答,維護腸道內(nèi)環(huán)境的免疫平衡。
在疾病研究領(lǐng)域,小腸黏膜上皮細胞的變化與多種腸道疾病密切相關(guān)。例如,在炎癥性腸?。ㄈ鐫冃越Y(jié)腸炎、克羅恩病)中,炎癥因子的刺激會導致上皮細胞受損,緊密連接結(jié)構(gòu)破壞,腸道屏障功能減弱,使得腸道通透性增加,有害物質(zhì)更容易進入機體,進一步加重炎癥反應。研究小腸黏膜上皮細胞在這些疾病中的病理改變,有助于深入理解疾病的發(fā)病機制,為開發(fā)針對性的治療藥物和干預措施提供理論依據(jù)。又如,在腸道感染性疾病中,病原體感染小腸黏膜上皮細胞后,會干擾細胞的正常代謝和功能,引發(fā)腹瀉、腹痛等癥狀,對上皮細胞與病原體相互作用機制的研究,也為疾病的防治提供了新的思路和靶點。