BEAS-2B(人支氣管上皮細(xì)胞)從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞。這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。BEAS-2B細(xì)胞保留了對(duì)血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽(yáng)性。該細(xì)胞引種自ATCC CRL-9609 ,又名人正常肺上皮細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)信息:
細(xì)胞名稱:BEAS-2B(人支氣管上皮細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B
生長(zhǎng)特性: 貼壁
培養(yǎng)條件: DMEM-H+10% FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%
細(xì)胞檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的人支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)細(xì)胞經(jīng)鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
BEAS-2B細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
● 消化條件:無(wú)鈣、鎂離子的PBS清洗細(xì)胞后,加1mL胰酉每,胰酉每潤(rùn)洗細(xì)胞表面3-4次后,吸走胰酉每,放入37℃培養(yǎng)箱消化2分鐘左右。(具體消化時(shí)間請(qǐng)?jiān)谀玫郊?xì)胞前2次傳代時(shí),及時(shí)觀察,以實(shí)際情況為主。)
● 終止消化時(shí),用1mL胰蛋白酉每抑制劑(2.5mg/mL)終止,離心去上清,然后用3mL PBS再次清洗細(xì)胞,離心收集后,用新的培養(yǎng)基重懸后鋪板。(消化過(guò)程中,不要拍瓶身,振蕩可促使細(xì)胞聚團(tuán)。)
● 注意:80%左右匯合度時(shí)傳代,完Q匯合會(huì)使細(xì)胞末端分化。
● 剛復(fù)蘇要使用提前用包被液包被過(guò)的培養(yǎng)器皿(包被液配方:0.01mg/mL黏連蛋白、0.03mg/mL Ⅰ型膠原和0.01mg/mL BSA),以增加細(xì)胞貼附。培養(yǎng)器皿提前使用包被液處理,包被時(shí)間至少4小時(shí),建議過(guò)夜。
● 包被液使用方法:加2-3mL到T25培養(yǎng)瓶(3-4mL到10cm培養(yǎng)皿),放無(wú)菌環(huán)境中,擰上蓋子,自然風(fēng)干。
● 復(fù)蘇后的傳代培養(yǎng)過(guò)程中可不做包被處理,細(xì)胞可正常貼壁。