前    言

糖類分析的主要目的有兩類：即單糖、寡糖的組成和多糖的分子量及其發(fā)布。糖類物質(zhì)的分離主要通過HPLC在色譜柱中實現(xiàn)，日本昭和電工長期致力于色譜柱研發(fā)生產(chǎn)，產(chǎn)品多種多樣，無論您的課題是涉及有機聚合物、蛋白質(zhì)及肽、糖類、有機酸、藥物或無機離子，您都可以找到一款合適的Shodex HPLC色譜柱。它性能優(yōu)異，主要體現(xiàn)在：；柱壽命長；優(yōu)良的機械強度和化學(xué)穩(wěn)定性。有關(guān)糖類分析用色譜柱詳見以下各章節(jié)。

絕大多數(shù)的糖類物質(zhì)無紫外吸收，所以不能很好地使用UV檢測器測定。其檢測手段目前常見的主要有以下三種。

1．示差折光檢測器RI

RI是一種通用型檢測器，具有廣泛的使用范圍，它對沒有紫外吸收的物質(zhì)，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等都能夠檢測。RI還適用于流動相紫外吸收本底大，不適于紫外吸收檢測的體系。在凝膠色譜中RI是*的，尤其是對聚合物分子量分布的測定。利用GPC+RI+標(biāo)準(zhǔn)品，我們可以得到被測物質(zhì)的相對分子量。

德國珊貝克公司的SCH2000檢測器是一種新概念示差折光檢測器， 它使用微處理器，使得從溶液置換到基線穩(wěn)定核查能夠自動進(jìn)行，穩(wěn)定快速。SCH2000與以往不同的液相色譜用示差折光檢測器相比，具有以下的特長：

*的操作性：*的快速平衡功能，在30分鐘內(nèi)自動平衡基線。檢測器配備彩色液晶顯示器， 易于分析人員一眼就看到操作狀態(tài)和基線傾向；自動啟動功能，使之可自動進(jìn)行從參比池的溶液置換到基線穩(wěn)定性核查的復(fù)雜操作；用幫助功能，很容易確定和校對裝置。

出眾的穩(wěn)定性：通過溫度調(diào)節(jié)方式的*化，電源打開后穩(wěn)定化時間縮短，并可獲得出眾的基線穩(wěn)定性。

安全措施：檢測器配備泄漏感應(yīng)器，萬一溶劑泄漏，泵可以自動停止。

多種自動功能：檢測器設(shè)有外部輸入輸出端子以及RS232C通道端口，把檢測器與各種液相色譜組合能實現(xiàn)高度自動化。

由于快速自動啟動功能，達(dá)到穩(wěn)定時間被減半。檢測器穩(wěn)定可在彩色顯示器上自動測定核查。

2.粘度檢測器

高聚物溶液中的[η]與分子量之間存在著以下定量關(guān)系：
3．光散射檢測器（LS）

光散射技術(shù)測定高聚物的重均分子量（按分子重量統(tǒng)計平均得到的分子量），是當(dāng)前應(yīng)用較為廣泛的一種方法。凝膠色譜分離－光散射檢測器的結(jié)合不但可以直接測量大分子的分子量及分布，還可以得到分子形狀、動力學(xué)半徑、枝化度等信息。

美國PD公司的PD2000系列的光散射*與70年代的小角光散射和80年代的多角光散射不同。小角光散射是忽略角度，只進(jìn)行濃度外推。多角光散射是忽略濃度。PD的光散射利用得拜公式，用角度和濃度同時參與計算。PD2000家族的儀器提供溶液中的聚合物和生物高分子新的的數(shù)據(jù)——分子量、尺寸、形態(tài)和其他的特征參數(shù)。它具有以下優(yōu)點：①高靈敏度；②*的重復(fù)性；③高精度；④易于操作；⑤快速從復(fù)以前的試驗結(jié)果；⑥易于拆卸清洗；⑦長期穩(wěn)定工作；⑧較小的池體積（10微升），與RI聯(lián)用引起峰加寬效應(yīng)?。虎岵捎镁劢构饴?，可以將散射體積見到zui小，得到很高的信噪比。其適用范圍涉及：1）仿生學(xué)和醫(yī)藥；2）塑料和其他的聚合物；3）蛋白質(zhì)和多糖類；4）油漆和涂料；5）石油化學(xué)制品；6）潤滑油；7）添加物 ；8）食品生產(chǎn)；9）環(huán)保等，政府，并且其他實驗室。

分離測試技術(shù)

除了常見的HPLC分離模式之外，現(xiàn)在又新興起了場流分離色譜（FFF），也可以用來進(jìn)行多糖的分離。非對稱場流分離色譜（AF4）屬于FFF家族的一員，是一個新的、有效快速分離和準(zhǔn)確描述不同的粒子和大分子的方法。它zui早在幾年前在文獻(xiàn)上有報道，是一個新的與色譜類似的分離技術(shù)，分離范圍用來從103到1012道爾頓。

德國POSTNOVA公司HRFFF 10.000系列非對稱場流分離色譜是以非對稱場流分析原理為基礎(chǔ)來工作的，是一項用來分離和表征流體中粒子和大分子的新穎和有效率的分離方法，它是世界上zui早的全自動化AF4系統(tǒng)。該系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)的配置包括不同的泵、檢測器、自動進(jìn)樣器等。10.000系列系統(tǒng)能通過樣品分子尺寸大小的差異來實現(xiàn)分離并檢測分子量、Rg、Rh等。其應(yīng)用范圍包括生物技術(shù)、多糖、藥物、蛋白質(zhì)、抗體、環(huán)境科學(xué)、材料科學(xué)等。

HRFFF 10.000優(yōu)勢包括：

l      不使用固定相，分離迅速準(zhǔn)確

l      直接進(jìn)樣，沒有必要的樣品預(yù)處理步驟

l      適用于不同的分離條件水相和有機溶劑，分子量和尺寸測定范圍大且容易得到

l      快速分離復(fù)雜的聚合物、粒子和膠體體系

l      分離中小的作用力能保護(hù)樣品的生物活性

更詳細(xì)的資料請查閱www.tjpuxiang.com，或來電來函向我們索取。

通過分離模式進(jìn)行色譜柱的選擇

凝膠滲透色譜（GFC）柱主要使用來分析淀粉等糖類物質(zhì)。但是在分析小分子量范圍且彼此之間分子量相近的糖時，僅僅憑借GFC模式就達(dá)不到一個令人滿意的結(jié)果了。Shodex 糖類分析用色譜柱由配位交換、離子交換、離子排阻、正/反相和凝膠過濾等多種模式組成，這些色譜柱適合于分析不同種類的糖。

通過樣品種類選擇色譜柱樣品種類所選擇色譜柱
普通食品中大的糖類SC1011
包含有寡糖的食品SC1821,KS-802,KS-802+SC1011
奶制品（蔗糖、奶糖）SP0810
發(fā)酵產(chǎn)品中的糖類、有機酸、醇類物質(zhì)SH1011,1821
包含糖酸的樣品，如：糖醛酸SH1011,1821
木材、果肉中的糖類SP0810

色譜柱 Selection: by Elution Volume
在下表中給出了Shodex SUGAR系列色譜柱KS-802，SC1011，SP0810，SC1211和SZ5532保留體積范圍。

色譜柱的選擇：通過糖的自然狀態(tài)

如下表所示，我們可以根據(jù)糖類的自然狀態(tài)來選擇色譜柱，像單糖、雙糖、寡糖、多糖、糖醇、有機酸、食物纖維。根據(jù)分析條件選擇色譜柱
如下表所示，可以根據(jù)分析條件進(jìn)行色譜柱的選擇。

根據(jù)糖類化合物進(jìn)行色譜柱的選擇下表中根據(jù)糖類化合物進(jìn)行色譜住的選擇。 要分離的糖類色譜柱的選擇
單糖
Glu,FruSP0810,SC1011,SC1211,KS-801
Glc,Gal,FruSP0810,SC1011,SC1211
Glc,Gal,ManSP0810
Glc,Gal,AraSP0810,SC1011,SZ5532
Glc,Xyl,AraSP0810,SC1011,SZ5532
Glc,Fru,山梨醇SC1011,SC1211,SC1811,SZ5532
Glc,Gal,山梨醇,DucitolSP0810,SC1011
Glc,Gal,Man,山梨醇,Ducitol,甘露醇SP0810
Glc,Fru,Gly,EtOHSC1011,SC1211,KS-801
Glc,Fru+alcoholsSC1011,SH1011,SC1211
Glc,Fru+organic acidsSH1011,SH1821
二糖
Suc,LacSZ5532
Suc,MalSZ5532
Suc,Mal,LacSZ5532
Mal,Iso麥芽糖SZ5532
Lac,LactuloseSP0810,SC1011
Suc,Glc,FruSC1011,SC1211,KS-801,SZ5532
Suc,Lac,Glc,Gal,FruSZ5532
Mal,Glc,Fru,Gly,EtOHSC1011,SC1211,KS-801
Cel,Glc,Gal,Man,Xyl,AraSP0810
Mal,Glc,Fru,山梨醇SP0810,SC1011,SC1211,SZ5532
Mal,Glc,Fru+alcoholsSC1011,SC1211,SH1011
Mal,Glc,Fru+organic acidsSH1011,SH1821
Suc,Glc,Fru,山梨醇SP0810,SC1011,SC1211,SC1821
Mal,MaltitolSP0810,SC1011,SC1211,SZ5532
Suc,Lac,Mal,MaltitolSZ5532
Glc,Suc,ErythrytolSP0810,SC1011,KS-801
Mal,Glc,Fru,ErythrytolSP0810,SC1011
寡糖
Sta,Raf,Mal,Glc,Gal,AraSC1011,KS-801,SZ5532
G4,G3,Mal,GlcSC1011,KS-801,KS-802
Sta,Raf,Suc,GlcSC1011,KS-801,SZ5532
Raf,Suc,Glc,Fru,AraKS-801
MaltooligosaccharideSC1821,KS-802,SZ5532
Maltooligosaccharide+alcoholsSC1821,KS-802,SH1821
Maltooligosaccharide+organic acidsSH1821
Maltooligosaccharide+sugar alcoholsSC1821,SC1011,KS-802
糖醇
木糖醇,山梨醇SC1011,SC1211,SZ5532
Sobitol,甘露醇,木糖醇SP0810,SC1211,SZ5532
Sobitol,Dulcitol,木糖醇SP0810,SC1011,SZ5532
Maltitol,山梨醇SC1011,SC1211,SZ5532
Maltitol,Dulcitol,Arabitol,木糖醇,甘露醇,山梨醇SC1211

Ara: 樹膠醛糖 Cel: 細(xì)胞乙糖 Fru: 果糖 G3: 麥芽三糖 G4: 麥芽四糖 Gal: 半乳糖 Glc: 葡萄糖 Gly: 甘油（丙三醇） Lac: 乳糖 Mal: 麥芽糖 Man: 甘露糖 Raf: 棉籽糖 Sta: 水蘇（四）糖 Suc: 蔗糖 Xyl: 木糖（戊醛糖）