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用中性粒細胞分離液提取中性粒細胞過程

時間:2010-10-22閱讀:4238
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銷售直線:021-31322331、一、實驗所需材料:

865512910、

hyf@ebioeasy.com

 

  1、中性粒細胞分離液(histopaque)

  2、全血

  3、Hanks液

  4、離心管若干

  5、離心機

  6、移液管,移液搶

  二、實驗步驟

  1. 將所有試劑放至室溫。

  2、用離心管收集全血1-2ml

  3、加等體積的Hanks液至全血中組成

  4、加2ml中性粒細胞分離液至裝至離心管中。

  5、將全血和Hanks液加入分離液中

  6、4℃,900r/min離心8-10min血液此時應該分為6層:血漿、單核細胞層、分離液、中性粒細胞、其余的分離液、紅細胞沉淀層。如果分層不是很明顯,會導致分離的細胞不純,則需要重復分離。

  7、用吸管小心地移去上面的三層(血漿、單核細胞和分離液)

  8、小心地吸取中性粒細胞層和其下面的分離液層,轉移至一個干凈的離心管中。

  9、加Hanks液3ml,后4℃,900r/min離心8-10min,棄上清,留沉淀,重復2次。

  10、如果細胞用來提RNA,可加Trizol 1ml保存。


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