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中級會(huì)員 | 第16年

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兔抗雞IgG-HRP技術(shù)參數(shù)

時(shí)間:2009/4/13閱讀:1498
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酶標(biāo)記抗體(Enzyme Antibody Conjugates)
 
       酶標(biāo)記抗體,是一類廣泛用于免疫學(xué)、分子生物學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)的各個(gè)分支學(xué)科中的特異、敏感和安全的免疫化學(xué)制劑。目前
較為常用的是將辣根過氧化物酶(HRP),經(jīng)過碘酸鈉氧化而標(biāo)記在抗體IgG分子上,而制成HRP—抗體結(jié)合物。
         本室向用戶提供的各類酶標(biāo)物,均根據(jù)本室建立的改良過碘酸鈉氧化法標(biāo)記而成。每種成品已加入一定濃度的BSA作為穩(wěn)定
劑。產(chǎn)品的工作濃度根據(jù)方法不同而別,用前-20℃凍存,避免反復(fù)化凍。
應(yīng)用范圍:
           抗原決定族的抗原性分析鑒定,各種抗原、抗體的定量、定性及定位分析測定等。
   工作中易產(chǎn)生的問題:
           1.包被抗體或抗原不適,易產(chǎn)生陽性值較小,或產(chǎn)生變異,即跳管現(xiàn)象。
           2.用抗血清不純化,或純化程度太低的抗體包被,則陽性值較小,或沒有陽性梯度。
           3.封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對照較高。
主要性能:
         每支0.1ml液體,內(nèi)含有HRP約200μg/支,IgG約含400μg/支,BSA300μg/支,-20℃保存,穩(wěn)定一年。4℃保存約3~6
個(gè)月,1:10稀釋,4℃可30天左右。稀釋液為:pH7.4 PBST。
工作效價(jià):
        直接ELISA法:1:500~1:1000,1:500~2000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0為陽性。
        免疫印跡法:1:200~400,免疫組化:1:20~40,斑點(diǎn)免疫1:200~400。
 

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