電穿孔是功能強大的將核酸、蛋白及其它分子導入多種細胞的高效技術。通過高強度的電場作用,瞬時提高細 胞膜的通透性,從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病 毒顆粒等導入原核和真核細胞內(nèi)。電轉(zhuǎn)化相對其它物理和化學轉(zhuǎn)化方法,是一種有價值和有效的替代方法。 Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)的設計,基于Bio-Rad 15 年來在電轉(zhuǎn)化技術上經(jīng)驗積累,它提供指數(shù)波和方波波型選擇、 系統(tǒng)配置選擇及友好的用戶界面。 主要特點 - 指數(shù)波和方波波型確保所有細胞類型(原核及真核)均可獲得* 的電轉(zhuǎn)化效果
- Bio-Rad 的* PulseTrac 電路和電弧保護設計,確??芍貜托?并保護樣品
- 模塊化設計可根據(jù)研究需要選擇系統(tǒng)
- 用戶友好的數(shù)字化界面,具有直觀的編程以控制所有參數(shù), 包括附屬模塊的參數(shù)
- 包括人工操作、預設規(guī)程、用戶規(guī)程、一個優(yōu)化規(guī)程及其它* 功能等程序選擇
* 美國4,750,100 和4,910,140。 指數(shù)波或方波脈沖選擇 Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)可產(chǎn)生指數(shù)波和方波波型,使你選擇zui 適合你細胞的波型與規(guī)程。指數(shù)波和方波均能有效地用于電轉(zhuǎn)化及 電融合。電穿孔波型對不同類型細胞的轉(zhuǎn)化效率有很重要的影響。 左,指數(shù)衰變脈沖。當一個充電至電壓為V 0 的電容器放 電到細胞,加在細胞上的電壓隨時間以指數(shù)方式下降。從 起始電壓下降到V0 / e 所需的時間稱為為時間常數(shù)τ, 一 種方便的脈沖時間表達方式。 右,方波脈沖。放電到樣品后截斷電容器脈沖可產(chǎn)生方 波脈沖。脈沖時間為細胞被放電的時間。所有方波設備都 會產(chǎn)生細微的電壓下降。這種電壓下降稱為脈沖下垂,并 以起始電壓的百分比計量。 PulseTrac 電路和電弧保護提供可靠的、可重復的和安全的性能 Bio-Rad *的微處理器控制電路能為任何規(guī)程提供可重復的結(jié)果,無論使用何種介質(zhì),它所產(chǎn)生的電壓 值可在*范圍內(nèi)測試。PulseTrac 電路和電弧保護: - 確保電壓準確地傳送到電擊杯
- 把CE 模塊中的低壓電容器精確度從20% 提升到10%
- 便于電容器再校正,以保持精確的脈沖指標,修正電容器隨著時間而發(fā)生的偏移
- 提供脈沖前樣品電阻測量
- 當脈沖或電路中斷時,可安全地自動放電
- 降低電弧危險,保護設備及樣品
用戶友好界面,便于編程和控制 主單元上的圖形界面可控制包括任何連接的附屬模塊在內(nèi)的所有功能。界面由一個通過功能鍵和字母數(shù)字鍵盤 操作的屏幕組成。根據(jù)屏幕提示進行簡便而直觀的編程。屏幕用于編程和顯示儲存與設定的程序、運行參數(shù)以及波 型。規(guī)程包括: - 人工編程以輸入或編輯方波或指數(shù)衰變脈沖的所有參數(shù)
- 輔助編程需要的時間常數(shù)
- 預設有適合常用細菌、真菌和哺乳動物細胞株的優(yōu)化程序
- 優(yōu)化規(guī)程
- 根據(jù)不同的波型選擇,顯示時間常數(shù)、實際電壓、脈沖間隔和脈沖時間等參數(shù)
- 儲存和調(diào)用* 個實驗的脈沖參數(shù)
預優(yōu)化規(guī)程,可快速選擇程序 這項功能為每個細胞株提供一組的預優(yōu)化參數(shù)。 提供以下細胞株的預設程序 哺乳動物 | 細菌 | 真菌 | CHO | Escherichia coli | Saccharomyces cerevisiae | COS-7 | Agrobacterium tumefaciens | Pichia pastoris | 3T3 | Pseudomonas aeruginosa | Candida albicans | 293 | Staphylococcus aureus | Schizosaccharomyces pombe | HeLa | Bacillus cereus | Dictyosium discoideum | BHK21 | Streptococcus pyrogenes | | A549 | Lactobacillus plantarum | | CV1 | | | K562 | | | HL60 | | | Jurkat | | | HuT78 | | | 這些細胞株的詳細參數(shù)及制備電感受態(tài)細胞的詳細信息可查詢Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)指導手冊或 discover.bio-rad.com 。 選擇你所需要的系統(tǒng) Gene Pulser Xcell 是由一個主單元、2 個附屬模塊(CE 與PC 模塊)及ShockPod 電擊槽組成的模塊式電穿 孔系統(tǒng)。CE 模塊與Gene Pulser Xcell 主單元配合使用可電轉(zhuǎn)化多數(shù)真核細胞(包括哺乳動物細胞和植物原生質(zhì) 體)。PC 模塊建議用于細菌和真菌的電轉(zhuǎn)化,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應用。系統(tǒng)有 3 種組合。 Gene Pulser Xcell 選擇系統(tǒng) 系統(tǒng) | 內(nèi)容 | Gene Pulser Xcell *系統(tǒng) | *系統(tǒng)包括PC 模塊和CE 模塊,具有用指數(shù)波或方波脈沖轉(zhuǎn)化真核與原核細胞的完整功能。 | Gene Pulser Xcell 真核系統(tǒng) | 真核系統(tǒng)由主單元及CE 模塊組成,可電轉(zhuǎn)化哺乳動物細胞和植物原生質(zhì)體。CE 模塊具有25-3,275 µF 跨度,提供了一種通過增加脈沖時間常數(shù)來控制電路電容的方法。對于方波脈沖,CE 模塊能提供從傳送方波脈沖到低電阻介質(zhì)所需的大電容。 | Gene Pulser Xcell 微生物系統(tǒng) | 微生物系統(tǒng)由主單元及PC 模塊組成,可電轉(zhuǎn)化細菌和真菌,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應用。通過將電阻器與樣品并聯(lián)放置,PC 模塊可控制電路電阻,從而提供了一種減少指數(shù)衰變脈沖時間常數(shù)的方法。 | ShockPod 電擊槽可更簡單快速地處理樣品 創(chuàng)新的ShockPod 槽設計適合單手操作,可快速而簡便地單手操作一個電 擊杯。只需抓住ShockPod 前部就能打開槽蓋。電擊杯狹槽的設計可確保電擊 杯只能以正確的方向插入。 ShockPod 擁有安全的聯(lián)鎖裝置,避免ShockPod 打開時脈沖傳送到電 擊杯。 |