在牙膏的生產(chǎn)過程中，如果一些化學(xué)反應(yīng)條件控制不當(dāng)，可能會(huì)促使丙烯酰胺的生成。丙烯酰胺長(zhǎng)期接觸可能會(huì)對(duì)人體造成潛在危害。

根據(jù)GB/T 44364-2024，測(cè)定牙膏中丙烯酰胺含量的方法是高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。原理是牙膏中丙烯酰胺經(jīng)水提取、正己烷凈化后，采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)，以保留時(shí)間和特征碎片離子豐度比定性，內(nèi)標(biāo)法定量。

實(shí)驗(yàn)涉及以下內(nèi)容：

1.標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備

1.1 0.1%（體積分?jǐn)?shù)）甲酸溶液：用Miragen電子移液器準(zhǔn)確移取1mL甲酸，用水稀釋至1L，混合均勻。

1.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品：丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品的英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量和化學(xué)結(jié)構(gòu)式見附錄A中表A.1，純度不小于98%。

1.3同位素內(nèi)標(biāo)：¹³C₃-丙烯酰胺的英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量和化學(xué)結(jié)構(gòu)式見表A.1，純度不小于98%。

1.4標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品（1.2）10mg（精確至0.0001g）于10mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，即得質(zhì)量濃度為1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。于2℃~8℃避光保存，可保存12個(gè)月。

1.5標(biāo)準(zhǔn)中間液：用Miragen電子移液器準(zhǔn)確移取0.1mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.4）于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，即得質(zhì)量濃度為2.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液。于2℃~8℃避光保存。

1.6內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取¹³C₃-丙烯酰胺內(nèi)標(biāo)5mg（1.3）于10mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，即得質(zhì)量濃度為500μg/mL的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。于2℃~8℃避光保存，可保存12個(gè)月。

1.7內(nèi)標(biāo)工作液：用Miragen電子移液器準(zhǔn)確移取0.1mL內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液（1.6）于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，即得質(zhì)量濃度為1.0μg/mL的內(nèi)標(biāo)工作液。于2℃~8℃避光保存。

1.8微孔濾膜：孔徑0.22um，材質(zhì)為尼龍66。

2. 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

用200μL規(guī)格的Miragen電子移液器，設(shè)置4個(gè)體積為15、25、50、100μL(程序可存儲(chǔ)和調(diào)用)，將4個(gè)體積的標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.5)分別加入至10mL容量瓶中；用1mL規(guī)格的Miragen電子移液器，設(shè)置2個(gè)體積為250、500μL，將2個(gè)體積的標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.5)分別加入至10mL容量瓶中，用200μL規(guī)格的Miragen電子移液器移取200μL內(nèi)標(biāo)工作液(1.7)加入至10mL容量瓶中；將以上7個(gè)容量瓶加水稀釋至刻度，得到系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。其中丙烯酰胺的質(zhì)量濃度分別為0.003、0.005、0.010、0.020、0.050μg/mL和0.100μg/mL，內(nèi)標(biāo)濃度為0.020ug/mL。將系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按高效液相色譜和質(zhì)譜參考工作條件進(jìn)行測(cè)定，以目標(biāo)物定量離子色譜峰的峰面積與內(nèi)標(biāo)離子峰面積比值為縱坐標(biāo)，與其對(duì)應(yīng)的溶液濃度比值為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。丙烯酰胺及其內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖見附錄B圖B.1。

實(shí)驗(yàn)室移取小體積（幾微升到10毫升）的液體，一般采用移液器。Miragen電動(dòng)移液器，數(shù)值靠設(shè)定或選定，電機(jī)控制活塞運(yùn)動(dòng)，吸液和排液也更加穩(wěn)定，還有步驟少、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢(shì)。

Miragen電動(dòng)移液器還可給電機(jī)多段信號(hào)，從而達(dá)到吸液和排液分次數(shù)且各段體積可調(diào)，可實(shí)現(xiàn)單吸多排、多吸單排等效果，程序還可存儲(chǔ)和調(diào)用，更加可靠、便捷。