細胞復蘇和凍存講究“慢凍快溶”，復蘇時一定要將凍存在液氮或-80℃中凝固的細胞凍存液快速融化至37℃，使胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。

●打開水浴鍋加熱至37℃。

● 超凈臺上放好離心管（離心管規(guī)格選用15ml的），細胞培養(yǎng)瓶，移液管，紫外滅菌至少20至30分鐘，吹風5至10分鐘除去臭氧。

● 37℃預熱好要復蘇細胞的培養(yǎng)液，也可以不用預熱培養(yǎng)液，根據(jù)細胞情況選擇。

●向離心管中加約5至10ml培養(yǎng)液，從液氮罐或-80℃中取出凍存細胞，立即將凍存管放入37℃水浴中并輕輕搖動，待融化后（約2min即可）立即將解凍的細胞轉移至含培養(yǎng)液的離心管中，800-1000rpm下離心5min，棄上清，加適量培養(yǎng)液輕輕吹打重懸細胞后轉移至細胞培養(yǎng)瓶中，輕晃使瓶底液體分散均勻，標好細胞名稱、代數(shù)、復蘇日期，顯微鏡下觀察后放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中。一般貼壁細胞過夜即可貼壁，換液和傳代時間根據(jù)不同細胞生長情況而定。