蛋白激酶 A(Protein Kinase A,PKA)是一種在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中具有重要作用的酶,PKA 全酶由四個(gè)亞基組成,包括兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基(R 亞基)和兩個(gè)催化亞基(C 亞基)。R 亞基和 C 亞基在無活性狀態(tài)下結(jié)合在一起,形成一個(gè)無活性的全酶。每個(gè) R 亞基上有兩個(gè) cAMP 結(jié)合位點(diǎn),當(dāng)細(xì)胞內(nèi) cAMP 水平升高時(shí),cAMP 與 R 亞基結(jié)合,導(dǎo)致 R 亞基發(fā)生構(gòu)象變化,從而與 C 亞基分離,釋放出具有活性的 C 亞基,進(jìn)而催化底物蛋白的磷酸化反應(yīng)。
生理功能
調(diào)節(jié)代謝:在肝臟細(xì)胞中,蛋白激酶A(PKA)通過磷酸化糖原合成酶降低其活性,從而抑制糖原的合成。同時(shí),PKA 還會(huì)對(duì)磷酸化酶激酶進(jìn)行磷酸化,從而激活其功能,進(jìn)一步激活糖原磷酸化酶,促使糖原的分解,導(dǎo)致血糖水平的升高。在脂肪細(xì)胞中,PKA 促進(jìn)激素敏感性脂肪酶的磷酸化,增強(qiáng)其活性,進(jìn)而加速對(duì)脂肪的分解,釋放出脂肪酸和甘油,供能給身體所需。
調(diào)控基因表達(dá):PKA 還能夠磷酸化多種轉(zhuǎn)錄因子,例如 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)。被磷酸化的 CREB 可以結(jié)合到靶基因啟動(dòng)子區(qū)域的 cAMP 反應(yīng)元件(CRE)上,進(jìn)而招募相關(guān)的轉(zhuǎn)錄激活因子,以促進(jìn)目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄。這一過程對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和增殖等生理活動(dòng)具有重要影響。
參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo):PKA 是眾多信號(hào)通路的關(guān)鍵組成部分,在神經(jīng)信號(hào)傳遞、細(xì)胞的增殖與分化及免疫反應(yīng)等多種生理過程中發(fā)揮著重要作用。以神經(jīng)元為例,PKA 在調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和突觸的可塑性方面起著重要作用,對(duì)學(xué)習(xí)、記憶等神經(jīng)功能發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。其實(shí),PKA 在細(xì)胞內(nèi)的多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制中,起到了橋梁的作用,使細(xì)胞能夠?qū)ν獠凯h(huán)境作出及時(shí)反應(yīng)。
用途
該試劑盒采用“一步”夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中PKA濃度。
靈敏性、檢測(cè)范圍、特異性和重復(fù)性
●檢測(cè)范圍:125 pg/mL– 4000 pg/mL
●靈敏性:10 pg/mL
●特異性:可檢測(cè)樣本中的PKA,且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
●重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均 < 10%。
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