抗體篩選是抗體藥物開發(fā)中的關(guān)鍵一環(huán)。目前代表性的抗體篩選技術(shù)包括雜交瘤技術(shù)、轉(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)、核糖體展示技術(shù)、單B細(xì)胞篩選技術(shù)等。

利用合成抗體庫(kù)以及從人或動(dòng)物中分離單個(gè)B細(xì)胞克隆的抗體發(fā)現(xiàn)流程，在生成了候選抗體庫(kù)之后，候選抗體的單獨(dú)表達(dá)和評(píng)估卻往往依賴于勞動(dòng)密集型程序（例如基于質(zhì)粒的克隆、轉(zhuǎn)染、基于細(xì)胞的蛋白質(zhì)表達(dá)、蛋白質(zhì)純化）。篩選過程需要數(shù)周至數(shù)月的時(shí)間，嚴(yán)重制約抗體篩選的速度和通量。

代表性抗體篩選技術(shù)

無(wú)細(xì)胞表達(dá)抗體示意圖

在抗體篩選方面，CFPS相比于細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)具有顯著優(yōu)勢(shì)：

①無(wú)需耗時(shí)的基因克隆、轉(zhuǎn)染、細(xì)胞培養(yǎng)流程，從線性DNA片段到候選抗體分子僅需數(shù)小時(shí)；

②可高通量、自動(dòng)化合成抗體，可適配高通量移液工作站進(jìn)行高通量、自動(dòng)化抗體表達(dá)，更節(jié)省人力成本。

基于細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)與基于CFPS的抗體篩選對(duì)比

珀羅汀無(wú)細(xì)胞抗體篩選，允許以線性化DNA片段作為模板，數(shù)小時(shí)內(nèi)表達(dá)候選抗體，產(chǎn)物可直接進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，無(wú)需純化。另外，珀羅汀生物無(wú)細(xì)胞技術(shù)允許二硫鍵生成，既可表達(dá)VHH、scFv抗體分子片段，也可表達(dá)Fab、全長(zhǎng)抗體，無(wú)抗體種類限制。

單B細(xì)胞+CFPS抗體篩選方案

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