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微生物學(xué)基礎(chǔ)性工作——微生物的分類和鑒定!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年03月20日 16:01  

百歐博偉生物:微生物的分類和鑒定是微生物學(xué)的基礎(chǔ)性工作。微生物分類是在對大量單個微生物進行觀察、分析和描述的基礎(chǔ)上,以它們的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理生化反應(yīng)和遺傳性等特征的異同為依據(jù),并根據(jù)生物進化的規(guī)律和應(yīng)用方便,將微生物分門別類地排列成一個系統(tǒng)。目前微生物分類鑒定方法分為以下幾個方面。

 

1、形態(tài)特征

 

①個體特征,包括在顯微鏡下的細胞大小、形狀、排列、運動性、鞭毛著生部位和數(shù)目、芽孢有無、部位和形狀、有無莢膜,放線菌和真菌繁殖器官的形狀、構(gòu)造、孢子數(shù)目、形狀、大小、顏色和表面特征等。

 

②群體特征即培養(yǎng)特征,菌落是菌株在一定的培養(yǎng)基中的群體特征。包括固體培養(yǎng)基上菌落的形狀、大小、顏色、光澤、黏稠度、隆起情況、透明度及邊緣特征,是否分泌水溶性色素、質(zhì)地、移動性和氣味;半固體培養(yǎng)基上穿刺接種后的生長及運動情況;液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)液混濁程度,表面有無菌膜,有無沉淀及其沉淀的形態(tài),有無氣泡產(chǎn)生,培養(yǎng)液的色澤變化等。

 

2、生理和生化特征

 

①營養(yǎng)來源 可以試驗多種糖能否被微生物作為碳源和能源利用,以及微生物對特定有機化合物和CO2的利用能力。對于氮源,看其是利用蛋白質(zhì)、蛋白胨、氨基酸或銨鹽、硝酸鹽中的氮,還是大氣中的游離氮。

 

②代謝產(chǎn)物 例如在培養(yǎng)基中檢測微生物有否形成有機酸、有否產(chǎn)生氣體,能否分解色氨酸產(chǎn)生吲哚,能否使硝酸鹽還原硝酸鹽或氮,能否產(chǎn)生色素或抗生素等。

 

③與溫度和氧氣的關(guān)系 有嗜熱菌,嗜冷菌,嗜溫菌之分,也有好氧菌,厭氧菌和兼性好氧菌之分。

 

3、血清反應(yīng)

 

將已知菌種、型或菌株制成抗血清,根據(jù)它是否與待鑒定對象發(fā)生特異性血清反應(yīng)鑒別未知菌。此反應(yīng)也用于病毒分類,尤其是噬菌體分類。

 

4、生態(tài)特性

 

微生物與其他生物的寄生或共生,細菌的致病性,微生物在自然界中是否耐高滲、是否嗜鹽性等。

 

5、生活史

 

親代個體經(jīng)一系列生長、發(fā)育階段而產(chǎn)生子一代個體的全部經(jīng)歷,就稱為該生物的生活史或生命周期。微生物個體發(fā)育的階段變化也是分類鑒別的重要依據(jù)。

 

6、對噬菌體的敏感性

 

與血清反應(yīng)類似,各噬菌體有嚴格的寄生范圍,可以根據(jù)菌體對噬菌體的敏感性進行區(qū)分。

 

7、核酸分析

 

DNA是遺傳物質(zhì)的攜帶者,決定生物的表型。遺傳信息在DNA中的存在形式表現(xiàn)為DNA的堿基數(shù)目及其排列順序。親緣關(guān)系越遠的種,其堿基數(shù)目和排列順序相差越大。

 

8、DNA雜交試驗

 

進一步判斷微生物間的親緣關(guān)系,須比較DNA的堿基序列,的方法是DNA雜交。其基本原理是DNA解鏈的可逆性和堿基配對的專一性。提取DNA并使之解鏈,再使互補的堿基重新配對結(jié)合成雙鏈。根據(jù)能生成雙鏈的情況,可測知雜合率。雜合率越高,表示兩個DNA之間堿基順序的相似越高,親緣關(guān)系也就越近。

 

9、細胞壁成分分析

 

不同微生物的細胞壁,在其組成單位的物質(zhì)基礎(chǔ)或在結(jié)構(gòu)方面有許多明顯的特殊性。比如,霉菌的細胞壁主要含有幾丁質(zhì);而細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖。革蘭陰性菌細胞壁的肽聚糖含量較低,另外還有多肽、脂蛋白及脂多糖等;革蘭陽性菌細胞壁肽聚糖的比例則較高,另外有蛋白質(zhì)、多糖、磷壁酸和磷璧質(zhì)等。

 

10、紅外光譜

 

一般認為每種物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)都具有特定的紅外光譜。若兩個樣品紅外吸收光譜相同,可以初步認為它們是同一種物質(zhì)。所以,利用紅外光譜技術(shù)測定微生物的化學(xué)成分,也能用于微生物分類,簡單快速,樣品用量少。

 

11、數(shù)值分類法

 

又稱統(tǒng)計分類法。根據(jù)“等重要原則”,不分主次,以分析多數(shù)特征為基礎(chǔ),進行菌株間兩兩比較,通過計算菌株間的總相似值來分群歸類,數(shù)據(jù)處理量較大,需借助于計算機實現(xiàn)。

 

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