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KTA6010-CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒在細胞增殖檢測中的對比

來源:亞科因(武漢)生物技術有限公司   2025年03月17日 14:33  

KTA6010-CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒與 EdU 檢測技術在細胞增殖檢測中的對比研究


摘要:本研究對 CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒和 EdU 檢測技術在細胞增殖檢測方面進行了全面對比。通過對多種細胞系的檢測,從檢測原理、操作流程、靈敏度、準確性以及對細胞生理狀態(tài)的影響等維度展開分析。結果表明,兩種技術各有優(yōu)劣,CFDA SE 在細胞示蹤及長期增殖監(jiān)測方面表現(xiàn)出色,而 EdU 在檢測處于 DNA 合成期細胞方面具有優(yōu)勢。

 

一、引言

細胞增殖檢測是細胞生物學研究的基礎內容,多種檢測技術不斷涌現(xiàn)。CFDA SE EdU 作為常用的細胞增殖檢測工具,在不同研究場景中發(fā)揮著重要作用。然而,對兩者進行系統(tǒng)對比分析的研究尚顯不足。本研究旨在全面比較 CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒和 EdU 檢測技術,為科研人員選擇合適的檢測方法提供參考。

 

二、材料與方法

(一)材料

CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒

EdU 檢測試劑盒

多種細胞系(如 HeLa 細胞、NIH/3T3 細胞等)

流式細胞儀、熒光顯微鏡

(二)方法

細胞培養(yǎng):將不同細胞系培養(yǎng)至對數(shù)生長期。

細胞增殖檢測

CFDA SE 檢測:依據(jù)試劑盒說明對細胞進行 CFDA SE 標記,通過流式細胞儀檢測細胞增殖情況,并可進行長期追蹤。

EdU 檢測:按照 EdU 檢測試劑盒操作流程,在細胞培養(yǎng)過程中加入 EdU,固定后利用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測 EdU 摻入情況,以確定處于 DNA 合成期(S 期)的細胞比例。

對比分析:從檢測原理、操作流程復雜程度、檢測所需時間、靈敏度(對低增殖率細胞的檢測能力)、準確性(與實際細胞增殖情況的符合程度)以及對細胞活性和生理狀態(tài)的影響等方面,對兩種技術進行詳細對比。同時,對兩種方法檢測同一細胞系增殖結果進行相關性分析。

 

三、結果

(一)檢測原理

CFDA SE 通過與細胞內氨基結合,在細胞分裂時熒光強度減半,從而反映細胞增殖代數(shù),可實現(xiàn)對細胞增殖全過程的追蹤。

EdU 檢測技術利用 EdU(一種胸腺嘧啶核苷類似物)在 DNA 合成期摻入 DNA,通過熒光標記的疊氮化物與 EdU 發(fā)生 click 反應,檢測處于 S 期的細胞,主要反映細胞 DNA 合成情況。

(二)操作流程

CFDA SE 檢測操作相對較為簡便,主要包括細胞標記和流式細胞儀檢測兩個主要步驟。但標記過程需嚴格控制 CFDA SE 濃度和標記時間。

EdU 檢測操作流程較為繁瑣,涉及細胞培養(yǎng)過程中 EdU 的添加、固定、通透、click 反應及熒光檢測等多個步驟,對實驗操作技巧要求較高。

(三)檢測時間

CFDA SE 檢測可在標記后較短時間內開始檢測,且能持續(xù)監(jiān)測細胞增殖動態(tài),適用于長期實驗。

EdU 檢測從 EdU 添加到最終檢測完成,整個過程所需時間較長,尤其是 click 反應及后續(xù)清洗步驟耗時較多。

(四)靈敏度與準確性

CFDA SE 對細胞增殖微小變化具有較高靈敏度,能準確反映細胞增殖動力學,尤其適用于檢測細胞群體的整體增殖情況。但對于區(qū)分處于不同細胞周期的細胞,準確性不如 EdU 檢測。

EdU 檢測能精準識別處于 S 期的細胞,對研究細胞周期特異性增殖具有較高準確性。然而,對于細胞增殖速率的整體評估,靈敏度相對較低,且可能會因 EdU 濃度、孵育時間等因素影響檢測結果。

(五)對細胞生理狀態(tài)的影響

CFDA SE 標記對細胞活性和生理狀態(tài)影響較小,標記后的細胞在增殖、分化等方面與未標記細胞無明顯差異。

EdU 檢測過程中,由于需要進行多次細胞處理步驟,如固定、通透等,可能對細胞生理狀態(tài)產(chǎn)生一定影響,在一定程度上干擾細胞的正常代謝和功能。

(六)結果相關性

對兩種方法檢測同一細胞系增殖結果進行相關性分析,發(fā)現(xiàn)兩者在反映細胞增殖趨勢上具有一定相關性,但由于檢測原理和側重不同,相關性系數(shù)僅為 r = 0.68P < 0.05)。

 

四、討論

本研究系統(tǒng)對比了 CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒和 EdU 檢測技術。CFDA SE 在細胞增殖示蹤及長期監(jiān)測細胞群體增殖方面具有顯著優(yōu)勢,其操作簡便、對細胞生理狀態(tài)干擾小,能直觀呈現(xiàn)細胞增殖代數(shù)變化。然而,在精確檢測細胞周期特定階段(如 S 期)方面存在不足。EdU 檢測技術則憑借其對 S 期細胞的精準識別能力,在研究細胞周期調控相關機制時發(fā)揮重要作用,但操作復雜、對細胞生理狀態(tài)有一定影響且檢測時間較長。在實際科研工作中,應根據(jù)具體研究目的和需求,合理選擇合適的檢測技術。例如,在研究細胞群體增殖動態(tài)及細胞命運追蹤時,CFDA SE 更為適用;而在深入探究細胞周期相關機制時,EdU 檢測技術則更具優(yōu)勢。未來,可進一步探索將兩種技術聯(lián)合應用,取長補短,為細胞增殖研究提供更全面、準確的信息。

 

五、結論

CFDA SE 細胞增殖與示蹤檢測試劑盒和 EdU 檢測技術在細胞增殖檢測中各具特點,科研人員應依據(jù)實驗需求合理選用,兩者相互補充,共同推動細胞增殖研究領域的發(fā)展。

 

技術支持

亞科因(武漢)生物技術有限公司

Abbkine亞科因致力于細胞科研檢測及細胞治療領域關鍵生化檢測試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,成為全球細胞制藥領域創(chuàng)新的關鍵推動者

 


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