茶多酚（TP）檢測試劑盒（酒石酸鐵微板法）

產(chǎn)品貨號：BA1570

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡介：

茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等，是一類兒茶素為主體的黃酮化合物，兒茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架結(jié)構(gòu)，是一種重要的天然抗氧化物質(zhì)，能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物，利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng)，生成穩(wěn)定紫藍(lán)色化合物，以酶標(biāo)儀540nm處測定吸光度，在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進而計算茶多酚含量，該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量，尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 茶葉、綠茶等待測樣本

2. 蒸餾水

3. 研缽、200目細(xì)胞篩

4. 離心管或試管

5. 水浴鍋或電爐

6. 離心機

7. 96孔板、酶標(biāo)儀

操作步驟（僅供參考）：

1. 準(zhǔn)備樣品：

①植物樣品：取0.2g植物組織，研磨成粉末，加入煮沸的蒸餾水10ml，沸水浴浸提20min，用200目細(xì)胞篩過濾，濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸的10ml蒸餾水，相同操作提取一次，合并兩次濾液，5000r/min離心15min，取上清液，即為茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測定。

③細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如有必要可用蒸餾水進行適當(dāng)勻漿，5000r/min離心15min，取上清液，即為茶多酚提取液，4℃避光保存。

④高濃度樣品：如果樣品中含有較濃度的茶多酚，可以使用蒸餾水進行適當(dāng)稀釋。

2. 配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)：用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按下表進行操作，依次稀釋。

3. TP加樣：取96孔板，按照下表設(shè)置空白孔、對照孔、測定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定，樣品的檢測能設(shè)置2平行孔，求平均值。

4. TP測定：以空白調(diào)零，酶標(biāo)儀測定540nm處標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔的吸光度。

計算：

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6號)(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標(biāo)，以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。

組織樣本TP含量(μg/g)= (C×V _T )/(W×V _S )

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T =提取液的總體積(ml)

W=組織樣本的重量(g)

V_S =測定時所用提取液的體積(ml)

液體樣本TP含量(μg/ml)= (C×V_T )/ V_S

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T=提取液的總體積(ml)

V_S=測定時所用提取液的體積(ml)

注意事項：

1. 提取茶多酚時，注意提前煮沸蒸餾水，以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。

2. 提取時間過長，茶多酚會發(fā)生氧化反應(yīng)，導(dǎo)致測定結(jié)果不準(zhǔn)確，建議2h內(nèi)測定完成。

3. 如果沒有分光光度計，也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定，但應(yīng)注意酶標(biāo)儀檢測體積。

4. 每次檢測指標(biāo)不宜過多，否則操作時間不一，有可能導(dǎo)致樣本間的差異。

5. TP顯色液容易失效，建議4℃避光保存。

6. 采用分光光度計未調(diào)零情況下，空白參考值為0.102，100μg/ml參考值為0.265，一般情況下濃度在200~600μg/ml 時測定結(jié)果更準(zhǔn)確。由于儀器設(shè)備、操作方法等不同，參考值會有差異。

7. 該試劑盒測定范圍為10~1200μg/ml；以肉眼觀察，濃度小于100μg/ml 幾乎呈無色，濃度大于100μg/ml即可顯淡紫藍(lán)色，300μg/ml呈明顯的紫藍(lán)色。

有效期：3個月有效。4℃運輸，4℃保存。