植物蛋白互作研究的利器:LUC實驗與UVP ChemStudio 695的強強聯(lián)合
摘要:
LUC已成為了解植物致病機制和信號通路轉導的關鍵工具,UVP ChemStudio 695可滿足您所有的成像需求
熒光素酶互補實驗(Luciferase Complementation Assay簡稱LUC,LCI,SLC,SFLC,LCA等)是一種以熒光素為底物來檢測熒光素酶活性的植物活體成像實驗。實驗中,熒光素酶蛋白被切成N端和C端2個功能片段,即NLuc和CLuc。在一個實驗體系中,待檢測的2個目標蛋白分別與NLuc和CLuc融合,如果2個目標蛋白相互作用,則熒光素酶的NLuc和CLuc在空間上會足夠靠近并正確組裝,從而發(fā)揮熒光素酶活性,氧化底物熒光素產(chǎn)生z強波長在560nm左右的生物熒光。
LUC實驗流程如下:

LUC實驗目前已成為高??蒲兄参飳W熱點研究手段,主要用于植物蛋白互作研究。通過觀察分析熒光素酶與底物之間的相互作用,研究人員可以發(fā)現(xiàn)新的蛋白質相互作用網(wǎng)絡。蛋白互作研究可用于植物學多個應用領域:如真菌、細菌等的植物致病機制研究,為植物保護提供有力支持;植物激素、代謝信號通路轉導研究,為研究植物的生長、發(fā)育和抗寒、抗旱、耐鹽等抗逆機制提供有力的研究工具。
中國科學院上海植物生理生態(tài)研究所林鴻宣院士研究團隊在植物學領域頂級期刊《Molecular Plant》(影響因子26)發(fā)表重要研究成果,系統(tǒng)解析了α/β水解酶家族成員STH1基因在水稻鹽脅迫應答與生殖發(fā)育協(xié)同調控中的分子機制。該研究通過正向遺傳學方法從非洲稻(Oryza glaberrima)中成功克隆STH1基因,并揭示其通過三個獨立且協(xié)同的分子功能模塊(膜脂代謝調控、蛋白穩(wěn)定性調控、光周期信號整合)實現(xiàn)環(huán)境適應與發(fā)育進程的動態(tài)平衡。研究團隊通過熒光素酶報告基因(LUC)實驗證實,STH1通過直接激活Hd3a啟動子活性正向調控水稻開花進程,而鹽脅迫誘導的STH1表達抑制則導致開花延遲,使植株優(yōu)先將資源分配至脅迫防御系統(tǒng)。
值得注意的是,德國耶拿公司UVP ChemStudio PLUS多功能成像系統(tǒng)憑借其高靈敏度化學發(fā)光檢測能力,成功實現(xiàn)了煙草葉片中熒光素酶信號的實時動態(tài)捕捉,為解析STH1-Hd3a轉錄調控網(wǎng)絡提供了關鍵實驗證據(jù)。該研究不僅創(chuàng)制了耐鹽性提升67.14%的優(yōu)異等位變異種質,更為作物抗逆與穩(wěn)產(chǎn)協(xié)同改良提供了理論依據(jù)。
德國耶拿UVP ChemStudio 695多功能成像儀可支持LUC實驗的植物活體成像,具有605萬高分辨率相機,F(xiàn)0.95大孔徑鏡頭,高光電轉化率(78%),低讀出噪音(3e-@1.7MHz),低暗電流( 0.0007 e/p/s )及相對-60℃的制冷能力,結合矩陣式RGB三色LED、氙燈和近紅外激光等高強度光源,可為客戶帶來高清晰度,高靈敏度的成像體驗!這款儀器不僅適用于熒光素酶互補實驗的植物活體成像,亦可兼容常規(guī)如核酸膠、蛋白膠、化學發(fā)光WB和熒光WB等成像實驗,滿足您所有的成像需求!
UVP ChemStudio 695多功能成像儀

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功能齊全:核酸/蛋白凝膠成像、WB化學發(fā)光成像
可擴展性:支持WB多色熒光成像、WB近紅外熒光成像、植物活體成像
具有審計追蹤功能,方便實驗室管理和文章評審的溯源,為您的論文發(fā)表保駕護航!
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