支原體是一類尺寸介乎細(xì)菌和病毒之間的原核細(xì)胞型病原微生物，沒有細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，一般致病性弱，主要黏附在細(xì)胞膜上獲取營養(yǎng)，損傷細(xì)胞膜，影響細(xì)胞正常生命活動，進(jìn)而引起泌尿系統(tǒng)感染、沙眼、肺炎等疾病。支原體直徑為0.2~0.3μm，結(jié)構(gòu)簡單，球形，具有較大的可變性，使用光學(xué)顯微鏡高倍相襯觀察，如果看到細(xì)胞核周圍大量靜止或布朗運(yùn)動的小黑點(diǎn)，可以推斷大概率為支原體。以下是使用相差生物顯微鏡和熒光生物顯微鏡觀察支原體的具體方法：

一、相差顯微鏡觀察

生物顯微鏡MHL2800

相差顯微鏡能夠觀察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本，可以觀察到支原體呈暗色微小顆粒，有類似布朗運(yùn)動的表現(xiàn)，在細(xì)胞表面或細(xì)胞之間游離或成群分布的形態(tài)和排列方式。支原體與細(xì)胞破碎后溢出的細(xì)胞內(nèi)容物如線粒體等頗相似，應(yīng)細(xì)加區(qū)別。

二、熒光顯微鏡觀察

熒光顯微鏡UB203i-FL

熒光顯微鏡觀察需要使用特殊的熒光染料或抗體對支原體進(jìn)行標(biāo)記，根據(jù)熒光反應(yīng)判斷是否感染。支原體屬于原核生物，可以使用DAPI等細(xì)胞核熒光染色劑染色，還可以使用相差熒光染料或抗體標(biāo)記。一般來說，支原體感染的細(xì)胞在熒光顯微鏡下會呈現(xiàn)出綠色或紅色熒光，這取決于所使用的熒光染料和抗體。

應(yīng)用實(shí)例：在呼吸道九聯(lián)檢查中，包含支原體肺炎檢測。使用熒光顯微鏡觀察時，如果觀察到紅色細(xì)胞外圍出現(xiàn)明亮的綠色熒光反應(yīng)，且形態(tài)為明顯的細(xì)胞膜或者胞漿，則可以判定為陽性，這些綠色的熒光信號標(biāo)記的就是肺炎支原體。相反，如果紅色細(xì)胞周圍無熒光或少量綠色熒光，且熒光較弱，則判定為陰性，這意味著樣本中未檢測到肺炎支原體。

三、觀察注意事項(xiàng)

支原體主要黏附在細(xì)胞膜上生存，沒有細(xì)胞壁，通常呈圓形或橢圓形，一般呈末端尖銳、表面有許多小突起的形態(tài)特征。

在觀察過程中，應(yīng)注意區(qū)分支原體與其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)或污染物。

熒光顯微鏡觀察診斷支原體肺炎屬于血清學(xué)檢測，要等發(fā)病后4~7日，體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)才能檢測出來，主要適合首診檢測陰性，復(fù)診仍然懷疑肺炎支原體感染的情況。

通過相差顯微鏡和熒光顯微鏡的觀察，可以更深入地了解支原體的形態(tài)、分布和感染情況，為疾病的診斷和治療提供有力支持。