激子耦合圓二色發(fā)生于大分子兩個手性生色團之間。當兩個生色團位置合適（距離短、角度合適、環(huán)境合適等），它們互相電子轉移產生兩個不同的CD帶，如圖1所示。激子耦合圓二色靈敏度和識別度高，它與給定的空間結構相關，可以獲得復雜結構的絕對構型信息。激子耦合圓二色經常用在高分子、手性有機凝膠或其他手性大分子的可見光區(qū)，也可用于蛋白的近紫外區(qū)，是傳統(tǒng)遠紫外圓二色譜的補充。

圖1：激子耦合能級說明

2-氨基嘌呤是經典的熒光標記物，它與胸腺嘧啶或胞嘧啶配對。當兩個2-氨基嘌呤相距較近，它們手性中心相互作用，大分子會扭曲并改變構象，這會產生激子耦合圓二色。本應用說明了在DNA和蛋白相互作用中，由2-氨基嘌呤導致的激子耦合圓二色。測試儀器為MOS-500圓二色光譜儀，波長范圍為300-360 nm，狹縫為2 nm，采樣速度為每點0.5 s。樣品濃度為10 uM，石英比色池光程為1 cm，室溫，沒有氮氣吹掃。空白采用同條件測試并自動扣減。

圖2：2-氨基嘌呤

含有2-氨基嘌呤的DNA-蛋白復合物的圓二色譜如圖3所示。由于DNA自身的圓二色吸收信號一直到310 nm，所以DNA-蛋白復合物的圓二色譜中只看得到正的克頓效應。最大信號在330 nm處為1.2 mdeg，可以看出MOS-500圓二色光譜儀靈敏度很高。通過對比可以看到，沒有加入DNA的圓二色光譜中沒有對應的與圓二色吸收，通過圓二色光譜可以很明顯區(qū)分有無激子耦合發(fā)生，如圖4所示。

圖3：圓二色譜：DNA+蛋白

圖4：有和沒有DNA情況下的圓二色譜

用標準配置的MOS-500圓二色光譜儀就可以很容易的測到激子耦合圓二色譜。通常激子耦合圓二色測試波長大于195nm，而MOS-500圓二色光譜儀在185nm以上不需要氮氣吹掃，可以極大的節(jié)省您儀器的運行成本。