紫外分光光度計的工作原理

紫外可見分光光度計的工作原理主要是基于朗伯-比耳定律。18世紀初，瑯伯在前人的基礎(chǔ)上，進一步研究了物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)厚度的關(guān)系，并于1760年指出：如果溶液的濃度一定，則光對物質(zhì)的吸收程度與它通過的溶液厚度成正比，這就是朗伯定律，其數(shù)學(xué)表達式為：

A=lgI。/I=K。b

式中，A為吸光度；I。為入射光強度；I為透射光強度；b為液層厚度（即光程）；K。為比例常數(shù)。

1852年，比耳研究了各種無機鹽的水溶液對紅光的吸收后指出：光的吸收和光所遇到的吸光度的數(shù)量有關(guān)；如果吸光物質(zhì)于不吸光的溶劑中，則吸光度和吸光物質(zhì)的濃度成正比，這就是比耳定律，其數(shù)學(xué)表達式為：

A=lgI。/I=K1C

式中，A為吸光度；I。為入射光強度；I為透射光強度；C為溶液的濃度；K1為比例常數(shù)。

將朗伯定律和比耳定律結(jié)合起來，則為朗伯-比耳定律，公式如下：

A=lgI。/I=K2bC

式中，A為吸光度；I。為入射光強度；I為透射光強度；C為溶液的濃度；b為液層厚度（即光程）；K2為比例常數(shù)。

朗伯-比耳定律認為：當一束光平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時，溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比，這就是朗伯-比耳定律的真正物理意義，它是光度分析中定量分析的基礎(chǔ)、根本的依據(jù)，也是紫外可見分光光度計的基本原理。

分光光度計正是根據(jù)朗伯-比耳定律，對物質(zhì)進行定量和定性分析的。