目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T十足目虹彩病毒 1(DIV1)熒光PCR試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
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貨號 | XY-D-0408 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Decapod iridescent virus 1 Detection Kit |
保存條件 | -20℃±5℃,避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產品簡介:
十足目虹彩病毒 1 感染 (Infection with Decapod iridescent virus 1,IDIV1),是一種能夠導致甲殼動物高死亡率(可達 100%) 的新發(fā)疫病。該病的病原為十足目虹彩病毒 1(Decapod iridescent virus 1,DIV1),為 DNA 病毒。目前包含兩個病毒株,即蝦血細胞虹彩病毒 (Shrimp hemocyte iridescent virus,SHIV) 和紅蝦虹彩病毒(Cherax quadricarinatus iridovirus,CQIV)。DIV1 在淡水、半咸水及海水中皆可存活,感染的宿主較為廣泛,主要以甲殼類動物為主,已知可以感染脊尾白蝦、紅鰲光殼鰲蝦、凡納濱對蝦、中國明對蝦、羅氏沼蝦、克氏原鰲蝦和日本對蝦等。感染后均表現(xiàn)出空腸空胃、肝胰腺萎-縮和顏色變淺等癥狀。其中,羅氏沼蝦因額劍基部甲殼蝦的造血組織被病毒侵染而呈現(xiàn)明顯白色病變區(qū)域,即產業(yè)上所說的“白頭"。
本試劑盒適用于檢測甲殼類動物的腮、肝胰腺、造血組織等樣本中的十足目虹彩病毒感染的輔助診斷。
產品特點:
一、嚴格的質控體系
所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量,讓您的檢測結果更可信。
二、高靈敏度
產品經過不斷優(yōu)化,具有出色的靈敏度,能夠檢測到極微量的十足目虹彩病毒 1核酸,不放過任何潛在的感染風險。
三、便捷操作
綜合各項指標特性,研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能輕松上手。
四、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證,適用于甲殼類動物的腮、肝胰腺、造血組織等多種常見樣本,滿足不同的檢測需求。
五、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,根據您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整,為您提供更貼合實際的檢測方案。
六、豐富的產品線
除了十足目虹彩病毒 1(DIV1)熒光PCR試劑盒,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,滿足您在不同領域的檢測需求。
七、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持,購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,讓您無后顧之憂。
產品參數:
產品規(guī)格
50T/盒,可滿足一定規(guī)模的檢測需求。
檢測方法
實時熒光PCR,具有快速、準確、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
標本采集
仔蝦采集除眼球和眼柄外的完整個體;幼蝦至成蝦階段采集頭胸部(腮、肝胰腺、造血組織)、附肢或血淋 巴。親蝦的非致死檢測采集血淋巴、附肢或糞便。仔蝦可以合并樣本檢測,個體稍大的蝦可按個體進行檢測。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h;若需長期保存,應放置-70℃以下保存,凍融不超過 3 次。
使用方法:
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
手術-剪剪碎混勻后取 0.05g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取, 請按照試劑說明書進行操作。
2.試劑配制(試劑準備區(qū))
根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;反應管數每滿 10 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:
試劑DIV1 反應液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,20μL/管。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品、陰性質控品各取 5μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,
短暫離心。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;
4.2設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25μL;熒光通道選擇:
檢測通道(ReporterDye)FAM,淬滅通道(QuencherDye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光, 選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數設置:
步驟循環(huán)數溫度時間收集熒光信號
11 cycle95℃2min否
245 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結果分析判定
5.1結果分析條件設定(請參照各儀器使用說明書進行設置,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應結束后自動保存結果,根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據實際情況自行調整,Start 值可設在 3~15、End 值可設在 5~20,使閾值線位于擴增曲線指數期,陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線),點擊 Analyze 自動獲得分析結果。
5.2結果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤40,且曲線有明顯的指數增長曲線; 陰性:樣本檢測結果無 Ct 值,且無特異性擴增曲線;
可疑:樣本檢測結果 40<Ct 值≤45,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性。
5.3質控標準
陰性質控品:無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示;
陽性質控品:擴增曲線有明顯指數增長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結果;
3.陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;
6.試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果;
7.本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
注意事項:
1.所有操作嚴格按照說明書進行;
2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,完-全混勻并短暫離心;
3.反應液應避光保存;
4.反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
9.本產品僅供科研。
選擇我們的十足目虹彩病毒 1(DIV1)熒光PCR試劑盒,就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!