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北京諾博萊德科技有限公司
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當(dāng)前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸提取>> 91511PAX Blood microRNA Kit 核酸提取

PAX Blood microRNA Kit 核酸提取

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)91511

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2025-04-18 16:52:20瀏覽次數(shù):25次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) 91511 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene?中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核
PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene®中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA);血液 RNA 管。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。
PAX Blood microRNA Kit 核酸提取

PAX Blood miRNA Kit

(For PAXgene Blood RNA Tube)



PAX Blood microRNA Kit 核酸提取


目錄號(hào):91511


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)


產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene®中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA);血液 RNA 管。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。

從保存試劑中取出樣品。對(duì)于儲(chǔ)存在 PAXgene 中的血液樣本®血液 RNA 管,通過(guò)離心收集細(xì)胞。樣品在含有蛋白酶 K 的優(yōu)化緩沖液下洗滌和裂解。將樣品離心以去除細(xì)胞碎片和其他顆粒。用異丙醇調(diào)整結(jié)合條件后,將樣品上樣到 RNA 結(jié)合柱上。通過(guò)短暫的離心或真空步驟,樣品通過(guò)結(jié)合 RNA/miRNA 的柱基質(zhì)。經(jīng)過(guò)三個(gè)洗滌步驟后,用不含 RNase 的水洗脫純化的 RNA/miRNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

配套PAXgene采血/RNA保存管提取血液microRNA

Kit Contents and Storage

Kit Contents

Storage

50 Preps (91511-50)

Resuspension Buffer

RT

20 ml

Binding Buffer

RT

50 ml

WashSolution 1

RT

12 ml

Add   indicated ethanol before first use

WashSolution 2/3

RT

10 ml

Add   indicated ethanol before first use

RNase-free H2O

RT

10 ml

DNase Buffer

–20 °C

1.25 ml x 2

RNase free DNase I

–20 °C

250 μl

Proteinase K

(20mg / ml)

–20 °C

20 mg x 1 tube

RNA

Binding Columns

RT

50

注意:

蛋白酶 K 是一種凍干物。離心幾秒鐘,然后用 1 ml 蒸餾水等分溶液復(fù)溶。在 –20 °C 下儲(chǔ)存。 避免反復(fù)凍融。所有試劑在zhi定溫度下儲(chǔ)存時(shí),可穩(wěn)定保存 9 個(gè)月。

描述:

PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene® Blood RNA Tube中的血液樣本中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA)。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。

從保存試劑中取出樣品。對(duì)于儲(chǔ)存在 PAXgene® Blood RNA Tubes 中的血液樣本,通過(guò)離心收集細(xì)胞。樣品在含有蛋白酶 K 的優(yōu)化緩沖液下洗滌和裂解。將樣品離心以去除細(xì)胞碎片和其他顆粒。用異丙醇調(diào)整結(jié)合條件后,將樣品上樣到 RNA 結(jié)合柱上。通過(guò)短暫的離心或真空步驟,樣品通過(guò)結(jié)合 RNA/miRNA 的柱基質(zhì)。經(jīng)過(guò)三個(gè)洗滌步驟后,用不含 RNase 的水洗脫純化的 RNA/miRNA。

用戶提供的材料和設(shè)備:

1. 微量離心機(jī)的離心能力為 13,000 x g

2. 100% 異丙醇

3. 不含 RNase 的過(guò)濾移液器吸頭

4. 不含 RNase 的水

5. 1.5 或 2.0 ml 微量離心管

6. 搖動(dòng)培養(yǎng)箱或加熱塊,溫度可達(dá) 55°C、65°C

7. 帶水平轉(zhuǎn)子的離心機(jī),離心力可達(dá) 5,500 x g

注意:

?shou次使用前,將規(guī)定量的乙醇加入 Wash 中溶液 1 和洗滌溶液 2/3 瓶,充分混合,并在瓶子上做標(biāo)記用支票。

? 將培養(yǎng)箱或加熱塊加熱至 55°C。

1. 使用水平轉(zhuǎn)子以 3,000-5,000 x g 的離心力離心 PAXgene® Blood RNA 管 10 分鐘。

2. 吸出并丟棄上清液。

3. 加入 4 mL 不含 RNase 的水。渦旋以wan全重懸沉淀。

4. 使用水平轉(zhuǎn)子以 3,000-5,000 x g 的離心力離心 PAXgene® Blood RNA Tube 10 分鐘。

5. 吸出并丟棄上清液。

注意:不wan全去除上清液會(huì)降低裂解效率并稀釋裂解物,從而降低 RNA 產(chǎn)量。

6. 加入 350 μl 重懸緩沖液。渦旋以wan全重懸沉淀。

7. 將樣品轉(zhuǎn)移到新的 1.5 ml 微量離心管中。

8. 加入 300 μL 結(jié)合緩沖液和 20 μL 蛋白酶 K 溶液。渦旋 5 秒鐘以充分混合。

9. 使用振蕩培養(yǎng)箱在 55°C 下孵育 10 分鐘。

10. 可選:將裂解物通過(guò)安裝在注射器上的 20 號(hào)針頭(直徑 0.9 mm)至少 5 次,或使用電子組織勻漿器勻漿。此步驟剪切基因組 DNA,降低裂解的粘度,提高產(chǎn)量。

11. 將勻漿以 13,000 rpm 離心 3 min。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
     12. 加入等體積的 100% 異丙醇。渦旋充分混合。

13. 將最多 700 μl 混合物轉(zhuǎn)移至 2 ml 收集管(提供)中的 RNA 結(jié)合柱中。

14. 以最大速度離心 1 分鐘。

15. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。

16.重復(fù)步驟 13-15,直到剩余樣品轉(zhuǎn)移到 RNA 結(jié)合柱中。

17. 加入 350 μl 洗滌液 1.

18. 以最大速度離心 1 分鐘。

19. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。

20. 對(duì)于每個(gè) RNA 結(jié)合柱,準(zhǔn)備 DNase I 消化

reaction mix as follows:

Buffer

Volume per Prep

10 Preps

DNase I Buffer

45 μl

450 μl

RNase-free DNase I

5 μl

50 μl

Total volume

50 μl

500 μl

重要提示:

• DNase I 對(duì)物理降解非常敏感,易受到影響。請(qǐng)勿對(duì) DNase I 混合物進(jìn)行漩渦混合。請(qǐng)通過(guò)翻轉(zhuǎn)試管輕柔混合。

• 請(qǐng)?jiān)?RNA 分離之前新鮮準(zhǔn)備 DNase I 儲(chǔ)備溶液。

• 標(biāo)準(zhǔn) DNase 緩沖液與膜上 DNase I 消化不兼容。使用其他緩沖液可能會(huì)影響 RNA 與基質(zhì)的結(jié)合,并可能減少 RNA 的產(chǎn)量和純度。

• 所有步驟必須在室溫下進(jìn)行。請(qǐng)快速但小心操作。21. 將 50 μl DNase I 消化反應(yīng)混合物直接吸取到 RNA 結(jié)合柱的中心表面上。

注意:確保將 DNase I 消化混合物直接移液到
膜。如果一些混合物保留在 RNA 結(jié)合柱的壁或 O
形圈上,則 DNase I 消化將不wan全
22. 在室溫下靜置 15 分鐘。
23. 加入 350 μl 洗滌液 1.以最大速度離心 1 分鐘。
24. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
25. 加入 500 μl 洗滌液 2/3。以最大速度離心 1 分鐘。
26. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
27. 重復(fù)步驟 25-26 進(jìn)行第二個(gè)洗滌液 2/3 洗滌步驟。
28. 以最大速度離心空的 RNA 結(jié)合柱 2 分鐘,以干燥柱基質(zhì)。

注意洗脫前干燥柱膜很重要。
留的乙醇可能會(huì)干擾下游應(yīng)用。
29. RNA 結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 微量離心管中。
30. 50-70 μl 不含 RNase 的水直接加入到膜中心(可選:將水預(yù)熱至 70–90°C 將增加 RNA 產(chǎn)量)。在室溫下靜置 1 分鐘。
31. 以最大速度離心 2 分鐘。

PAX Blood microRNA Kit 核酸提取



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