諾博萊德 脂多糖（LPS）提取試劑盒

脂多糖（LPS）提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號(hào)：P4975

產(chǎn)品名稱：脂多糖（LPS）提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：脂多糖（LPS）提取試劑盒

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P4975 脂多糖（LPS）提取試劑盒

產(chǎn)品簡介：

脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜的主要成分，結(jié)構(gòu)很復(fù)雜、熱穩(wěn)定性ji高（在250℃下干熱滅菌2h才wan全滅活）。受LPS發(fā)現(xiàn)的歷史原因，如今LPS的概念幾乎等同于內(nèi)毒素（endotoxin）。LPS由多糖鏈和脂質(zhì)A組成，不同細(xì)菌間的多糖鏈?zhǔn)歉叨茸兓?，決定細(xì)菌的血清型；而脂質(zhì)A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和機(jī)體的毒性病理生理活動(dòng)，包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測(cè)LPS的存在來診斷腦膜炎。

由于LPS與機(jī)體免疫機(jī)能的密切關(guān)系，生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究，如闡明LPS 的結(jié)構(gòu)，代謝，免疫學(xué)，生理學(xué)，毒性，生物合成途徑；誘導(dǎo)生長促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌；誘導(dǎo)疾病研究的動(dòng)物模型如炎癥反應(yīng)，急性肺損傷。

LPS提取試劑盒采用簡單步驟即可快速提取細(xì)菌脂多糖，提取產(chǎn)量高，省時(shí)，蛋白質(zhì)和核酸污染低。

適用樣本：細(xì)菌

注：試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、適用性廣，能從所有革蘭氏陰性菌中提取 LPS。

2、操作簡單方便。

3、提取 LPS 下游應(yīng)用廣，包括直接用于免疫刺激。

使用方法：

一、使用注意事項(xiàng)：

1. 離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對(duì)離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM）兩種表示方式，有些離心機(jī)設(shè)置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機(jī)沒有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算：g=r×1.118×10^-5×rpm²（r為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長度，單位為厘米)例如:轉(zhuǎn)速為3000rpm，有效離心半徑為10 cm，則相對(duì)離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）。

2. 可以用試劑盒或者ben酚硫酸法進(jìn)行脂多糖定量。

二、脂多糖（LPS）提?。?/span>

1. 室溫 8000×g 離心 3 分鐘收獲細(xì)菌細(xì)胞。

2. 加入 500μl 試劑 A 重懸細(xì)菌，8000×g 離心 3 分鐘，棄上清。

【注】：

每次處理 50 mg-200 mg 濕重菌體均可。

3. 收集沉淀，加入 500μl 試劑 A 重懸沉淀，8000×g 離心 3 分鐘，棄上清。

4. 收集沉淀，加入 500μl 提取液 B 重懸沉淀。

5. 在 150-300w 超聲 10 秒間隔 10 秒，超聲 5-15 分鐘。

【注】：

沒有超聲條件可以不超聲。

如果超聲時(shí)出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率過大，需要降低功率。

避免產(chǎn)生泡沫。

6. 在 10000×g 離心 10 分鐘取上清。

7. 在上清中加入 500μl 提取液 C，劇烈渦旋 20 秒充分混勻。

8. 在 66-68℃水浴或氣浴孵育 30 分鐘。中間隔 10 分鐘用移液器輕輕吹打混勻。

9. 置 4℃靜置過夜。

【注】：

急用的樣本可以將 4℃靜置時(shí)間縮短至 2 小時(shí)。

10. 在 4℃，3000×g 離心 20 分鐘。

11. 取最上層上清至另一干凈離心管，即得脂多糖樣品。

【注】：

樣品中含有鹽。如果有需要可以透析或超濾脫鹽后再用于下游實(shí)驗(yàn)。

透析或超濾脫鹽后凍干稱重，根據(jù)需要溶解到合適濃度用于下游實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

脂多糖（LPS）提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

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