AAT Bioquest  16359  Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒

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AAT Bioquest熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮活性試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  16359  Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)酶標(biāo)儀優(yōu)化的 NIR 熒光*  200 Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：16359

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)酶標(biāo)儀優(yōu)化的 NIR 熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：200 Tests

AAT Bioquest熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮活性試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  16359  Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)酶標(biāo)儀優(yōu)化的 NIR 熒光*  200 Tests，產(chǎn)品說明：

yi氧化氮（NO）是一種重要的生物調(diào)節(jié)因子，參與許多生理和病理過程。NO生成改變與各種免疫，心血管，神經(jīng)退行性和炎癥性疾病有關(guān)。作為一種自由基，NO被迅速氧化，體內(nèi)存在的NO濃度相對(duì)較低。檢測(cè)和理解NO在生物系統(tǒng)中的作用一直具有挑戰(zhàn)性。細(xì)胞計(jì)™熒光法細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮檢測(cè)試劑盒為監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)NO水平提供了靈敏的工具。在我們的試劑盒中開發(fā)并使用了硝酸™探針，作為DAF-2的 jue jia 替代品，用于檢測(cè)和成像細(xì)胞中的游離NO。與常用的DAF-2探針相比，硝酸™探針具有更好的光穩(wěn)定性和增強(qiáng)的細(xì)胞通透性。該特定試劑盒使用Nitrixyte™ NIR，可以與NO反應(yīng)以產(chǎn)生強(qiáng)烈的近紅外（NIR）熒光信號(hào)。Nitrixyte™ NIR可以很容易地加載到活細(xì)胞中，并且可以使用Cy5®或APC的濾光片組方便地監(jiān)測(cè)其熒光信號(hào)。該試劑盒針對(duì)熒光成像和酶標(biāo)儀應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。

平臺(tái)

熒光酶標(biāo)儀

Excitation：650 納米

Emission：680 納米

Cutoff：665 納米

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：底部讀取模式

組件

組分A：氮化近™紅外  1 瓶（50 μL，500X）

組分B：檢測(cè)緩沖液I   1 瓶 （20 mL）

組分C：檢測(cè)緩沖液II 1 瓶 （20 mL）

1.    在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞

2.    用測(cè)試化合物和硝基近™紅外工作溶液孵育細(xì)胞

3.    添加檢測(cè)緩沖液II

4.    監(jiān)測(cè)Ex/Em = 650/680 nm時(shí)的熒光強(qiáng)度

重要說明：使用前在室溫下解凍所有試劑盒組件。

工作溶液的制備

將 20 μL 硝酸™近紅外儲(chǔ)備溶液（組分 A）加入 10 mL 檢測(cè)緩沖液 I（組分 B）中并充分混合。工作溶液在室溫下可穩(wěn)定保存至少2小時(shí)。注意：20 μL 硝基近™紅外儲(chǔ)備溶液足以用于一塊板。避光保存。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    為了刺激內(nèi)源性NO，在細(xì)胞培養(yǎng)基或所需的緩沖液（如PBS或HHBS）中用10 μL 10X測(cè)試化合物（96孔板）或5 μL 5X測(cè)試化合物（384孔板）處理細(xì)胞。對(duì)于對(duì)照孔（未處理的細(xì)胞），加入相應(yīng)量的培養(yǎng)基或復(fù)合緩沖液。注意：在添加化合物之前不需要清洗細(xì)胞。但是，如果測(cè)試化合物對(duì)血清敏感，則可以在添加化合物之前吸走生長(zhǎng)培養(yǎng)基和血清因子。抽吸后加入 90 μL/孔（96 孔板）和 20 μL/孔（384 孔板）的 1X Hank 鹽溶液和 20 mM Hepes 緩沖液 （HHBS） 或您選擇的緩沖液?；蛘撸?xì)胞可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

2.    在細(xì)胞板中加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的硝酸™ NIR 工作溶液。將細(xì)胞與測(cè)試化合物和硝酸™近紅外工作溶液在 37°C 下共孵育所需的時(shí)間，避光。注意：請(qǐng)勿去除測(cè)試化合物。注意：對(duì)于NONOate陽(yáng)性對(duì)照處理：將細(xì)胞與硝酸™ NIR工作溶液在37°C下孵育30分鐘。除去工作溶液，并將細(xì)胞進(jìn)一步與1mM DEA / NONOate在37°C下孵育30分鐘以產(chǎn)生yi氧化氮。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見圖 1。我們使用 Raw 264.7 細(xì)胞在 0°C 的細(xì)胞培養(yǎng)基中與 5.20X 硝基™近紅外、1 μg/mL 脂多糖 （LPS） 和 37 mM L-精an酸 （L-Arg） 一起孵育 16 小時(shí)。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見圖 2。

3.    去除每個(gè)孔中的溶液。添加檢測(cè)緩沖液II（組分C），100孔板為96 μL/孔，25孔板為384 μL/孔。注意：添加檢測(cè)緩沖液II前不要洗滌細(xì)胞。

4.    使用酶標(biāo)儀在Ex / Em = 650 / 680nm（截止= 665nm）下以底部讀取模式監(jiān)測(cè)熒光增加，或使用帶有Cy5®濾光片的熒光顯微鏡拍攝圖像。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

16359  Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)酶標(biāo)儀優(yōu)化的 NIR 熒光*  200 Tests