MCE 鏈霉親和素磁珠用于生物素化核酸、生物素化抗體的分離和檢測(cè) | MCE

閱讀：26 發(fā)布時(shí)間：2025-2-19

MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報(bào)，我們不為任何個(gè)人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)。

鏈霉親和素磁珠

MCE 國際站：Streptavidin Magnetic Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號(hào)：HY-K0208

中文名稱：鏈霉親和素磁珠

存儲(chǔ)條件：4°C，2年請(qǐng)勿離心、干燥或冷凍磁珠。

產(chǎn)品活性：MCE 鏈霉親和素磁珠用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測(cè)。

生物活性：MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面，形成單分子固定層，可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測(cè)。由于具有單層的鏈霉親和素，其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點(diǎn)在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素，而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標(biāo)，使用簡單有效。 1. 載量高 2. 非特異性低/p> 3. 樣品損失少 4. 即開即用

描述及優(yōu)勢(shì)：

MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面，形成單分子固定層，可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測(cè)。由于具有單層的鏈霉親和素，其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點(diǎn)在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素，而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標(biāo)，使用簡單有效。

1. 載量高

2. 非特異性低

3. 樣品損失少

4. 即開即用

操作流程：1. 固定化核酸 1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注：用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計(jì)算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結(jié)合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上步驟1次。3) 加入 500 μL 用 Wash Buffer I 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育(室溫, 30 分鐘；4°C, 2 小時(shí))。4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。5) 加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上步驟1次。注：可通過測(cè)定反應(yīng)前后核酸的濃度，計(jì)算結(jié)合到磁珠上的核酸量。2. 固定化抗體/蛋白 1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注：用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計(jì)算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結(jié)合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上步驟1次。3) 加入 1 mL 用 Wash Buffer II 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉(zhuǎn)混合儀上旋轉(zhuǎn)孵育(室溫, 60 分鐘；4°C, 4 小時(shí))。4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。5) 加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上步驟4次。3. 洗脫 3.1 生物素標(biāo)記核酸的洗脫步驟：向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ，65°C 孵育 5 分鐘或 90°C 孵育 2 分鐘，置于磁力架，磁性分離，收集上清。3.2 生物素標(biāo)記抗體/蛋白的洗脫a 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS–PAGE 檢測(cè)。步驟：向磁珠中加入 50–100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻， 95°C 加熱 5 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清，進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測(cè)。注：如果選擇變性洗脫，那么洗脫液將包含鏈霉親和素單體和聚體、生物素標(biāo)記抗體或蛋白。b 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：向磁珠中 50–100 μL Elution Buffer Ⅱ，室溫孵育 5–10 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性，樣品用于后期功能分析。注：注：如果選擇非變性洗脫，酸性條件下鏈霉親和素可能會(huì)脫落，需注意孵育時(shí)間不要超過 10 分鐘；酸性洗脫液能破壞大部分的抗體與抗原的相互作用，但為了更好的洗脫效果，可預(yù)先用 1 mL 0.1% Tween-20 的水溶液洗滌磁珠 1 次。