利用

ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固定化和抗原或抗體的酶標(biāo)記。固相載體表面結(jié)合的抗原或抗體仍保留其免疫活性，而酶標(biāo)抗原或抗體同時(shí)保留其免疫活性和酶活性。在測(cè)量過(guò)程中，測(cè)試樣品（其中的抗體或抗原）與固體支持物表面的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。在固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物通過(guò)洗滌與液體中的其他物質(zhì)分離。然后添加酶標(biāo)記的抗原或抗體，并在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中與固體支持物結(jié)合。此時(shí)，固相上的酶量與樣品中分析物的量成正比。加入酶促反應(yīng)的底物后，底物被酶的有色產(chǎn)物催化，產(chǎn)物的多少與樣品中分析物的量直接相關(guān)，可進(jìn)行定性或定量分析。關(guān)于顏色深度。由于酶的高催化效率，間接放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，并且該測(cè)定達(dá)到了高靈敏度。 ELISA可用于測(cè)量抗原和抗體。

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。

中文名ELISA 試劑盒

外文名ELISA Kit

問(wèn)世時(shí)間60-70年代

特點(diǎn)試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便

ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。

ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。

操作方法

雙抗體夾心法

1. 包被：以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質(zhì)含量為 1-10 μg/ml。 9.含氧碳酸鹽涂層緩沖液。在 4°C 下將 0.1 ml 添加到每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中過(guò)夜。次日，棄孔中溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，每次3分鐘。 （以下也稱(chēng)為清掃）。

2、加樣：向上述包被好的反應(yīng)液中加入0.1ml的特定稀釋待測(cè)樣品，37℃孵育1小時(shí)。然后洗。 （同時(shí)創(chuàng)建空白孔、陰性對(duì)照孔和陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3. 酶標(biāo)抗體的加入：每個(gè)反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（滴定后稀釋?zhuān)?.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時(shí)并洗滌。

4、加入底物溶液顯色：在每個(gè)反應(yīng)孔中加入0.1ml臨時(shí)配制的TMB底物溶液，37℃孵育10-30分鐘。

5. 反應(yīng)結(jié)束：向每個(gè)反應(yīng)孔中加入 0.05 ml 2M 硫酸。

6、結(jié)果的判斷：在白色背景上可以用肉眼直接觀察結(jié)果。反應(yīng)孔越深，陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng)，陰性反應(yīng)無(wú)色或非常淺。表示“-"符號(hào)。您還可以測(cè)量 OD 值。用ELISA檢測(cè)器在450nm（ABTS顯色時(shí)為410nm），用空白對(duì)照孔調(diào)零，如果大于OD值的2.1倍，測(cè)量各孔的OD值。的陰性對(duì)照為陽(yáng)性。

同產(chǎn)品展示：

大鼠Dickkopf 1 （ELISA）試劑盒

大鼠Dickkopf 1抗體 （ELISA）試劑盒

大鼠Dickkopf 2 （ELISA）試劑盒

大鼠DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶 （ELISA）試劑盒