背景介紹
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種基于酶反應(yīng)檢測蛋白質(zhì)(如致病蛋白、抗原和抗體)的簡便方法。這種方法的潛在應(yīng)用取決于被評估的抗原-抗體反應(yīng)的特異性和強(qiáng)度。由于ELISA需要使用純化的抗原和功能特殊的抗體，因此研究人員強(qiáng)烈建議使用其他方法，如LC-MS（液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用）和各種芯片實(shí)驗(yàn)室方法。目前LC-MS診斷的發(fā)展趨勢是專注于藥物和生物標(biāo)志物(包括多肽和類固醇)的檢測，因?yàn)楹茈y制備針對這些小分子的合適抗體，基于芯片實(shí)驗(yàn)室的平臺被認(rèn)為提供了更容易的樣品制備、化學(xué)操作和反應(yīng)，并使用各種新的檢測技術(shù)。除了該限制外，ELISA法有許多優(yōu)點(diǎn)，包括簡單、實(shí)用(如果將其用作比色法，則不需要特殊和昂貴的儀器)、快速和合理的成本。傳統(tǒng)的ELISA法的挑戰(zhàn)是其檢測靈敏度。ELISA夾心法是將識別同一目的蛋白的兩個不同表位的抗體固定在固體表面并進(jìn)行特異性捕獲的方法，適用于定量檢測。許多研究報告經(jīng)過一些方法修改后的ELISA法具有很高的檢測靈敏度，從而提供了超靈敏的ELISA法。