液相色譜系統(tǒng)的分離過(guò)程是儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
液相色譜系統(tǒng)清洗的具體步驟:
1、用甲醇沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過(guò)泵的所有管路。
2、用水沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過(guò)泵的所有管路。
3、以等比例方式通過(guò)泵的所有管路導(dǎo)入~30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)。在沖洗期間活動(dòng)所有的閥,包括:參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等。
4.用水沖洗所有管路和系統(tǒng)。必要時(shí)用6N硝酸(HNO3)重復(fù)以上步驟。否則,跳到第7步。注意:硝酸是一個(gè)強(qiáng)紫外吸收溶液。除非絕對(duì)需要,不要做鈍化程序。
5.以等比例方式通過(guò)泵的所有管路導(dǎo)人6N硝酸水溶液(大約是40%)。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)。
6.用水沖洗系統(tǒng),仔細(xì)檢查是否有任何滲漏,在沖洗期間反復(fù)活動(dòng)所有的閥,包括:參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等。
注意:如果你要用低于270nm的紫外波長(zhǎng)作檢測(cè),則需要更大量水的清洗過(guò)程,不斷的換新鮮水并活動(dòng)各個(gè)閥(沖洗進(jìn)樣器,等)以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會(huì)觀察到在低紫外波長(zhǎng)下有負(fù)的基線漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。
7.返回到甲醇洗,然后繼續(xù)用實(shí)驗(yàn)所需的溶劑沖洗。
8.通過(guò)軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測(cè)器的自動(dòng)回零功能恢復(fù)。
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