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大小鼠水迷宮實驗操作方法

時間:2024/6/26閱讀:194
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Morris水迷宮(Morriswatermaze,MWM)實驗是一種強(qiáng)迫實驗動物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺的一種實驗,Morris水迷宮主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力,被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的手選經(jīng)典實驗。




     在介紹實驗步驟之前,我們需要先了解下水迷宮實驗的兩大要素,驅(qū)動力和考核內(nèi)容。水迷宮的驅(qū)動力是小鼠本能對水環(huán)境的厭惡,這就會驅(qū)使小鼠想盡快離開這個環(huán)境,其中略低于水面的平臺就可以讓小鼠基本達(dá)成逃離水環(huán)境的目標(biāo),因此小鼠有動力盡快找到這個平臺;而考核內(nèi)容則是分析小鼠是不是能夠盡快學(xué)會用周圍的提示物(Cues)為線索找到水下平臺,絕大多數(shù)的水迷宮實驗主要(但不限于)以下三個部分:


     1、平臺可見期實驗(2days) 2、平臺隱藏期訓(xùn)練(5day) 3、無平臺期檢測(1day)


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圖一:標(biāo)準(zhǔn)水迷宮實驗日期表(不含適應(yīng)環(huán)境期)




     實驗需要用到的儀器: 系統(tǒng)由水迷宮水池、攝像系統(tǒng)以及Xeye動物行為軌跡分析系統(tǒng)組成。



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實驗方法;


     1. 獲得性訓(xùn)練


   (1)將動物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,放入位置隨機(jī)取東、西、南、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間(s)。在前幾次訓(xùn)練中,如果這個時間超過60s,則引導(dǎo)動物到平臺。讓動物在平臺上停留10s.


   (2)將動物移開、擦干。必要時將動物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,放回籠內(nèi)。每只動物每天訓(xùn)練4次,兩次訓(xùn)練之間間隔15~20min,連續(xù)訓(xùn)練5d。


     2. 探查訓(xùn)練


     最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,將平臺撤除,開始60s的探查訓(xùn)練。將動物由原先平臺象限的對側(cè)放入水中。記錄動物在目標(biāo)象限(原先放置平臺的象限)所花的時間和進(jìn)入該象限的次數(shù),以此作為空間記憶的檢測指標(biāo)。


    3. 對位訓(xùn)練


     測定動物的工作記憶(workingmemory)。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開始維持4天的對位訓(xùn)練。將平臺放在原先平臺所在象限的對側(cè)象限,方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。


    4. 對位探查訓(xùn)練


    最后一次對位訓(xùn)練的第二天進(jìn)行。方法與上述探查訓(xùn)練類似。記錄動物60s內(nèi)動物在目標(biāo)象限(平臺第二次所在區(qū))所花時間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。


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