一
常見的細(xì)胞培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基（MM）
基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。合成培養(yǎng)基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細(xì)胞保持良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
培養(yǎng)基的種類有很多，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是應(yīng)用較為廣泛的。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。具體的特征及應(yīng)用如下：
完-全培養(yǎng)基（CM）
完-全培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加了血清、抗生素等物質(zhì)，也叫（血清）細(xì)胞培養(yǎng)基。其中大部分細(xì)胞培養(yǎng)常用的是牛血清，因?yàn)榕Ｑ逯泻写龠M(jìn)細(xì)胞增殖的各種生長(zhǎng)因子。此外為防止污染，培養(yǎng)液中尚需加一定量的抗生素。
完-全培養(yǎng)基根據(jù)添加血清量的多少，可分為細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基和細(xì)胞維持培養(yǎng)基，用于不同細(xì)胞和不同研究。
無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基（SFM）
無(wú)血清培養(yǎng)基是指在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上引入成分完-全明確或部分明確的血清替代成分，主要是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加物（替代血清的補(bǔ)充因子）組成。其主要成分為下列幾種：
黏附因子
約有80%的細(xì)胞是屬于貼附型生長(zhǎng)。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基是利用血清作為其來(lái)源，在無(wú)血清培養(yǎng)基中，細(xì)胞黏附因子就是很重要的物質(zhì)。
生長(zhǎng)因子
生長(zhǎng)因子是維持細(xì)胞活性與促進(jìn)細(xì)胞增生、遷移、分化等，不可-或缺的要素。
酶抑制劑
貼附型細(xì)胞一般多以胰蛋白酶（trypsin）進(jìn)行傳代。在一般細(xì)胞培養(yǎng)中，血清中含有抑制trypsin的成分，所以無(wú)血清培養(yǎng)基必須添加trypsin抑制劑。
細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)之前，要留有種子細(xì)胞，種子細(xì)胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中，以保證細(xì)胞的特性不發(fā)生變化。
優(yōu)點(diǎn)
1 | 未知組分少； |
2 | 避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染； |
3 | 雜蛋白含量少，避免血清成分影響研究結(jié)果或是產(chǎn)品制程，提高產(chǎn)品表達(dá)水平并易于純化。 |
缺點(diǎn)
1 | 無(wú)血清培養(yǎng)基成本較高； |
2 | 不是所有的細(xì)胞都能在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)； |
3 | 細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中易受某些機(jī)械因素和化學(xué)因素的影響，培養(yǎng)基保存和應(yīng)用方面局限性很大。 |
二
細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類很多，如何選擇適宜的培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵。在此提供以下建議可供參考：
1
如果是新購(gòu)買的細(xì)胞，可以向細(xì)胞株的廠家咨詢，或者詢問(wèn)引種來(lái)源查找細(xì)胞庫(kù)上對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基；
2
根據(jù)細(xì)胞的特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基；
3
自己試驗(yàn)，用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，做生長(zhǎng)曲線，記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)速度，觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇最佳培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基種類和細(xì)胞系并不是一個(gè)強(qiáng)制的對(duì)應(yīng)關(guān)系。具體培養(yǎng)細(xì)胞使用什么培養(yǎng)基，主要還是根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)、文獻(xiàn)和經(jīng)驗(yàn)哦！
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