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SFR vario監(jiān)測(cè)顯示多參數(shù)方法的重要性

閱讀:748      發(fā)布時(shí)間:2024-1-9
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在比較僅測(cè)量一個(gè)參數(shù)或受益于使用 SFR vario 進(jìn)行在線多傳感器監(jiān)測(cè)的釀酒酵母培養(yǎng)物的結(jié)果時(shí),多參數(shù)方法勝出。它表明,在不同的培養(yǎng)階段,不同的傳感器提供最佳結(jié)果,從而可以在不同的培養(yǎng)階段獲得可靠的整體圖像和最確鑿的信息。

SFR vario 可監(jiān)測(cè)多個(gè)獨(dú)立測(cè)量的參數(shù),例如氧氣、pH 值、CO2、生物質(zhì)和 OUR,并提供全貌。這些信號(hào)可以相互驗(yàn)證,以獲得更高的生物過(guò)程安全性以及更可靠和可重復(fù)的生產(chǎn)。它為整個(gè)文化時(shí)期提供了不間斷的結(jié)論性信息。這使其成為搖瓶規(guī)模工藝開發(fā)的理想工具。該產(chǎn)品靈活、可擴(kuò)展,并使用無(wú)線技術(shù)進(jìn)行連接。蘇黎世應(yīng)用科學(xué)大學(xué)的研究人員進(jìn)行的基礎(chǔ)研究*是對(duì)釀酒酵母培養(yǎng)物進(jìn)行的,但監(jiān)測(cè)微生物培養(yǎng)物的多參數(shù)方法的原理也可以應(yīng)用于其他培養(yǎng)物。

生物質(zhì),O2和大腸桿菌生長(zhǎng)過(guò)程中的pH監(jiān)測(cè)

大腸桿菌K12在含有葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中顯示出明顯的雙氧生長(zhǎng),可以用SFR變量監(jiān)測(cè)。測(cè)量被停止數(shù)次以進(jìn)行離線采樣 - 以確定底物濃度 - 顯示在圖表中的間隙中。在第一個(gè)生長(zhǎng)期,葡萄糖被消耗(1)。該系統(tǒng)在較低的生物量范圍內(nèi)顯示出較低的精度,但隨著細(xì)胞密度的增加而改善。雖然細(xì)菌產(chǎn)生的乙酸降低了培養(yǎng)基的pH值,但氧濃度的強(qiáng)烈降低到10%a.s.表明高代謝活性。當(dāng)葡萄糖濃度降至0.1g L以下時(shí)-1大約6小時(shí)后(離線測(cè)定,此處未顯示數(shù)據(jù))生長(zhǎng)停止,氧氣水平迅速上升。這也顯示在在線測(cè)量的生物量曲線(2)中的小平臺(tái)(放大插入)中。在這個(gè)階段,細(xì)菌將其新陳代謝調(diào)整為乳糖。只有通過(guò)新的在線監(jiān)測(cè)系統(tǒng)才能在停止氧氣消耗和生長(zhǎng)的情況下記錄這種精確匹配。在第三階段,大腸桿菌在乳糖上生長(zhǎng),直到被消耗并且培養(yǎng)物變成固定期(3)。

復(fù)雜培養(yǎng)基中的酵母生長(zhǎng)階段

K. marxianus在以葡萄糖為底物的搖瓶中培養(yǎng)時(shí)顯示出兩個(gè)生長(zhǎng)階段。在第一階段,葡萄糖在需氧條件下代謝(1),氧含量持續(xù)降低到5%以下。由于代謝產(chǎn)物,pH值從7降低到6.1。培養(yǎng)9小時(shí)后,葡萄糖全部消耗(離線測(cè)定,此處未顯示數(shù)據(jù)),pH再次升高。在第二期 - 氧氣有限 - 階段K. marxianus表現(xiàn)出顯著的生長(zhǎng)速度,這可以在散射光(=生物質(zhì))測(cè)量中清楚地觀察到(2),同時(shí)在高需氧量下代謝第一階段產(chǎn)生的葡萄糖產(chǎn)物。使用SFR變量同時(shí)監(jiān)測(cè)氧氣、pH和生物量為培養(yǎng)監(jiān)測(cè)和代謝過(guò)程評(píng)估提供了全新的可能性。

復(fù)雜培養(yǎng)基中的酵母生長(zhǎng)階段

K. marxianus在以葡萄糖為底物的搖瓶中培養(yǎng)時(shí)顯示出兩個(gè)生長(zhǎng)階段。在第一階段,葡萄糖在需氧條件下代謝(1),氧含量持續(xù)降低到5%以下。由于代謝產(chǎn)物,pH值從7降低到6.1。培養(yǎng)9小時(shí)后,葡萄糖全部消耗(離線測(cè)定,此處未顯示數(shù)據(jù)),pH再次升高。在第二期 - 氧氣有限 - 階段K. marxianus表現(xiàn)出顯著的生長(zhǎng)速度,這可以在散射光(=生物質(zhì))測(cè)量中清楚地觀察到(2),同時(shí)在高需氧量下代謝第一階段產(chǎn)生的葡萄糖產(chǎn)物。使用SFR變量同時(shí)監(jiān)測(cè)氧氣、pH和生物量為培養(yǎng)監(jiān)測(cè)和代謝過(guò)程評(píng)估提供了全新的可能性。


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