志賀氏菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、病人糞便樣品中志賀氏菌的快速檢測。志賀氏菌顯白色或無色，有些宋內(nèi)氏志賀氏菌有藍(lán)色中心；大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色；沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心；其它細(xì)菌顯藍(lán)綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長；是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。

成份 (g/L)

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。

注意

此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

用法

稱取本品 17.12g 加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱1分鐘左右。冷卻至45-50℃時，傾入無菌平皿。
注意：制備好的培養(yǎng)基注意保持表面干燥，可在36±1℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時。

貯存

制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃，注意避光保存。

失效

干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

操作步驟

1、按GB標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取25克樣品液加入225ml GN增菌液或志賀氏菌增菌肉湯中，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定時間增菌培養(yǎng)； 3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到志賀氏菌顯色培養(yǎng)基上，做2個平板；
4、36±1℃培養(yǎng)20-24h，志賀氏菌顯白色或無色，有些宋內(nèi)氏志賀氏菌有藍(lán)色中心；大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色；沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心；其它細(xì)菌顯藍(lán)綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長；
5、對典型菌落做全套生化試驗(yàn)和志賀氏菌血清學(xué)試驗(yàn)。

質(zhì)量控制

1 、外觀

此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈灰白色至淡粉色。制備好的平板呈紅色固體培養(yǎng)基。

2 、微生物試驗(yàn)

在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 20 ～ 24h 小時：

方法的局限性

本培養(yǎng)基上的典型志賀氏菌必須做生化試驗(yàn)或血清學(xué)試驗(yàn)。

檢驗(yàn)原理：

利用非志賀氏菌的特異性的酶，使其與酶底物結(jié)合形成不同顏色的菌落，而生化特性反應(yīng)不活躍的志賀氏菌經(jīng)22～28h培養(yǎng)后，則形成易于識別的白色-粉紅色(與培養(yǎng)基顏色相近)的菌落。志賀氏菌呈白色/清晰的菌落，大小約為1～3mm，周圍培養(yǎng)基變紅。

典型特征

志賀氏菌顯白色或無色，有些宋內(nèi)氏志賀氏菌有藍(lán)色中心；大腸桿菌和大腸菌群顯綠色或黃色；沙門氏菌顯黃色或無色并有黑色中心；其它細(xì)菌顯藍(lán)綠色或黃色。變形桿菌和銅綠假單胞菌基本不生長。

不同細(xì)菌在志賀氏菌顯色培養(yǎng)基上的生長特征：