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氨基酸脫羧酶試驗用培養(yǎng)基使用方法
閱讀：210 發(fā)布時間：2024-8-30| 提 供 商 | 青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司 | 資料大小 | 22.2KB |
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稱取本品0.4g，加入0.5g L-氨基酸（或鹽酸鹽），溶解于100mL蒸餾水中，用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，使滅菌后在6.8左右（不同形式的氨基酸pH不同，因此加入氨基酸后需對培養(yǎng)基的pH進行調(diào)整），分裝于試管，并覆蓋液體石蠟，121℃滅菌15min，冷卻后備用。
注意事項：1.氨基酸有L型和D型，通常需要使用的是L型氨基酸，若使用的氨基酸為L型D型混合的，配制培養(yǎng)基時需將氨基酸的量加倍（即添加量為1g/100mL）；2.不同的氨基酸pH有差異，一般呈堿性，但市場上售賣的氨基酸多為鹽酸鹽形式（鹽酸鹽形式的氨基酸更為穩(wěn)定，不易變質(zhì)），一般呈酸性，因此配制培養(yǎng)基時，加入氨基酸后必須對培養(yǎng)基的pH進行調(diào)整；3.在厭氧環(huán)境下更有利于保存細菌分解葡萄糖產(chǎn)生的酸，及促進氨基酸脫羧酶的產(chǎn)生，因此需覆蓋液體石蠟隔絕氧氣，不覆蓋石蠟有可能導致結(jié)果不正確。4.有些細菌的氨基酸脫羧酶產(chǎn)生較慢，因此在遇到陰性試驗結(jié)果時，有時需延長培養(yǎng)數(shù)天才可觀察到陽性結(jié)果。5.本試驗的原理是細菌前期分解葡萄糖產(chǎn)酸，后期分解氨基酸產(chǎn)堿，培養(yǎng)基呈現(xiàn)由紫色變黃再變紫的過程，最終陽性結(jié)果為紫色，但有些細菌不能分解葡萄糖產(chǎn)酸，培養(yǎng)基全程都是紫色，此時容易誤判為陽性結(jié)果，因此在進行氨基酸脫羧酶試驗是，需要同時接種對照管（即不添加氨基酸的培養(yǎng)基管），當對照管與試驗管均為黃色時為陰性反應，當對照管為黃色，試驗管為紫色時，為陽性反應，若對照管未變黃，說明細菌為產(chǎn)堿型或氧化型，不能直接判斷陰陽性。