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淺談流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證和校準(zhǔn)怎么做？

流式細(xì)胞儀在生物藥廠里面，不論計(jì)量校準(zhǔn)還是驗(yàn)證，都是科研和QC工作者頭疼的問題；

問題1：買了很多年了，驗(yàn)證會(huì)不會(huì)通不過，計(jì)量會(huì)不會(huì)通不過

問題2：做一次計(jì)量動(dòng)輒5200以上的成本。

問題3：驗(yàn)證很多第三方不會(huì)做，廠家做一次太貴了。

那怎么解決這些流式細(xì)胞儀驗(yàn)證和校準(zhǔn)問題呢？

流式細(xì)胞儀的測(cè)量原理：流式細(xì)胞計(jì)可同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量，信息主要來自特異性熒光信號(hào)及非熒光散射信號(hào)。測(cè)量是在測(cè)量區(qū)進(jìn)行的，所謂測(cè)量區(qū)就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點(diǎn)。液流中央的單個(gè)細(xì)胞通過測(cè)量區(qū)時(shí)，受到激光照射,這些生物學(xué)參數(shù)又和細(xì)胞對(duì)光線的反射、折射等光學(xué)特性有關(guān)。未遭受任何損壞的細(xì)胞對(duì)光線都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信號(hào)對(duì)不經(jīng)染色活細(xì)胞進(jìn)行分析和分選。經(jīng)過固定的和染色處理的細(xì)胞由于光學(xué)性質(zhì)的改變，其散射光信號(hào)當(dāng)然不同于活細(xì)胞。

一、那么流式細(xì)胞儀計(jì)量校準(zhǔn)包括哪些內(nèi)容呢？

1、    分辨力

2、    線性相關(guān)系數(shù)

3、    檢出限

4、    漂移

5、    重復(fù)性

6、    示值誤差

二、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)準(zhǔn)備

1、熒光微球，單一熒光強(qiáng)度

2、多重?zé)晒鈴?qiáng)度混合熒光微球標(biāo)準(zhǔn)品

3、計(jì)數(shù)熒光微球

4、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

校準(zhǔn)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不確定度不超過20%（K=2）

注：流式細(xì)胞儀復(fù)校間隔建議一般不超過1年；

三、流式細(xì)胞儀驗(yàn)證

驗(yàn)證一般在藥廠都是源自自己的工藝，校準(zhǔn)也是驗(yàn)證的一部分，下面來看，其實(shí)驗(yàn)證和校準(zhǔn)有很多重合的地方。流式細(xì)胞儀的性能評(píng)估，是評(píng)定儀器能否勝任高復(fù)雜性流式應(yīng)用的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)流式細(xì)胞儀的性能評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)流式細(xì)胞儀的以下指標(biāo)進(jìn)行了評(píng)估：

1、檢測(cè)靈敏度；

2、動(dòng)態(tài)范圍；

3、群體分辨能力；

4、線性度；

5、穩(wěn)定性；

6、可重復(fù)性；

7、對(duì)微顆粒的檢測(cè)能力；

下面來看部分檢測(cè)結(jié)果：

每日質(zhì)控微球rCV統(tǒng)計(jì)

八峰彩虹微球在流式細(xì)胞儀上的檢測(cè)結(jié)果

對(duì)不同大小的微球檢測(cè)結(jié)果

以上就是我們關(guān)于流式細(xì)胞儀驗(yàn)證大概的所做的內(nèi)容，去測(cè)試流式細(xì)胞儀的穩(wěn)定性、重復(fù)性、靈敏度高，從而去驗(yàn)證儀器的性能。

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如下是在校準(zhǔn)結(jié)果報(bào)告中體現(xiàn)的表格，供用戶去參考。

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