一、色譜柱的堵塞：
任何來(lái)自流動(dòng)相或樣品的顆粒物質(zhì)都會(huì)污染色譜柱濾網(wǎng)，一些顆粒還可能遷移到柱子填料中，這將導(dǎo)致柱子背壓的增加。這給泵帶來(lái)了更大的壓力，并可能導(dǎo)致柱子沉降，產(chǎn)生空隙從而導(dǎo)致峰的分裂。高效液相色譜柱在使用過程中會(huì)遇到許多不同的物質(zhì)，如緩沖液中的鹽或流動(dòng)相和樣品中的雜質(zhì)，這些物質(zhì)可能比被分離的分析物有更少或更多的保留。這些不希望出現(xiàn)的干擾，如果被檢測(cè)器觀察到，就會(huì)表現(xiàn)為鬼峰、斑點(diǎn)、基線顛倒甚至是負(fù)峰。吸收的雜質(zhì)可能對(duì)保留機(jī)制產(chǎn)生負(fù)面影響（縮短保留）或開始作為新的固定相（增加保留）。
HPLC 色譜柱是 HPLC 系統(tǒng)的關(guān)鍵部件，需要小心處理和保護(hù)。HPLC 系統(tǒng)的高效運(yùn)行取決于流動(dòng)相和樣品是否不含化學(xué)雜質(zhì)或固體懸浮液。頻繁更換色譜柱的成本很高，因此您的目標(biāo)應(yīng)該是最大限度地延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，以便每次都能獲得所需的準(zhǔn)確度和一致性結(jié)果。
二、延長(zhǎng)色譜柱壽命最直接的解決措施是什么？
當(dāng)然是使用保護(hù)柱! 保護(hù)柱會(huì)過濾所有的顆粒，積累非特異性的吸附物質(zhì)，也會(huì)延長(zhǎng)在微堿性pH值下使用的分析柱的壽命。但需要注意的是，保護(hù)柱的顆粒最好與分析柱的顆粒大小相同、材料類型相同、壓力規(guī)格也應(yīng)與主柱相匹配。還有就是，什么時(shí)候更換保護(hù)柱比較好呢？一般建議是當(dāng)樣品的性質(zhì)發(fā)生變化時(shí)，當(dāng)背壓增加約10%-15%時(shí)，或按計(jì)劃/時(shí)間更換保護(hù)柱（例如，每200-500次注射–取決于注射量和樣品的純度）。保護(hù)柱對(duì)于任何從事色譜工作的分析員來(lái)說都很熟悉，保護(hù)柱是一種典型的色譜耗材，它安裝在主柱前面，通過收集和捕獲顆?；虿豢赡娼Y(jié)合物質(zhì)來(lái)保護(hù)主柱免受來(lái)自樣品、基質(zhì)或洗脫液的雜質(zhì)的影響。它延長(zhǎng)了更昂貴的主柱的生命周期并且作為更便宜的組件，更換更頻繁。
三、液相保護(hù)柱的注意事項(xiàng)：
1.注意每次操作時(shí)都要按照標(biāo)注方向來(lái)使用。
2.不使用保護(hù)柱會(huì)使分析柱或制備柱直接受到污染，從而縮短其實(shí)際使用壽命。
3.選擇保護(hù)柱體積可按照色譜柱體積的5~10%即可。
4.選擇保護(hù)柱柱芯的填料最好和色譜柱內(nèi)的填料相同。
恒譜生保護(hù)柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù)，延長(zhǎng)了液相色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時(shí)間的增加，高效液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量色譜硅膠填料被污染引起的，而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞，使用色譜柱保護(hù)柱，相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個(gè)色譜柱的作用。
今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
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