DNA probes-Scorpions Primers

DNA probes-Scorpions Primers

Scorpions引物利用了一種單分子機(jī)制，該機(jī)制在溶液中的作用更快，可用于實時PCR中的瞬時熒光。與分子信標(biāo)類似，這些引物在PCR循環(huán)過程中不需要酶切探針。這些特性使Scorpions引物成為快速，實時PCR，終點PCR，SNP檢測和基因定量的有價值的工具。

Scorpions Architecture

Scorpions primers are probe/primer hybrids unlike other FRET probes, whose design is such that they emit light only when incorporated into the PCR product during amplification. These primers incorporate two distinct structures: 1) a target-specific DNA probing sequence and 2) a target-specific PCR primer.

DNA探測序列

DNA探測元件在3'和5'末端并入了一個自我互補(bǔ)的莖序列，該序列將目標(biāo)特定區(qū)域保持在發(fā)夾環(huán)中。 熒光團(tuán)分子與5'端共價連接，而深色淬滅劑（黑洞猝滅染料）與環(huán)結(jié)構(gòu)的3'端連接。 熒光團(tuán)和BHQ染料通過莖結(jié)構(gòu)保持緊密的物理距離，以確保在熱循環(huán)之前進(jìn)行有效的淬滅。

目標(biāo)特異性引物

靶特異性PCR引物通過封閉部分與DNA探測序列的3'端共價連接。 該部分防止聚合酶延伸到探測元件中，這可能表現(xiàn)為假陽性。