µ-Dish 35毫米，高生物惰性 現(xiàn)貨
非粘附表面上的球體，類器官和懸浮細胞的長期培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡
優(yōu)于標準的超低附著（ULA）表面：穩(wěn)定，具有生物惰性的表面，可進行長期實驗，而沒有任何細胞或生物分子的粘附
出色的顯微質(zhì)量，沒有任何自發(fā)熒光：100％表面鈍化以及ibidi Polymer Coverslip的光學(xué)質(zhì)量

µ-Dish 35毫米，高生物惰性 現(xiàn)貨

µ-Dish 35毫米，高生物惰性 現(xiàn)貨

應(yīng)用范圍：

• 沒有支架的球體和類器官的生成和長期培養(yǎng)
• 懸浮體中的類器官，球體，類胚體（EB）和細胞的高分辨率熒光顯微鏡
• 細胞間相互作用的無背景分析
• 防止由于附著引起的干細胞分化
• 未附著狀態(tài)的懸浮細胞培養(yǎng)
• 自組裝腫瘤球形成測定
• 3D腫瘤球體模型

技術(shù)特點

• µ-Dish 35毫米，高，具有非粘附性，鈍化的生物惰性表面
• 無需事先表面處理或準備即可使用
• 200 nm親水性多元醇水凝膠-穩(wěn)定且共價鍵合
• 沒有蛋白質(zhì)，抗體，酶和其他生物分子的吸附，包被或結(jié)合
• 與所有固定劑和染色液兼容
• 無自發(fā)熒光
• 無細胞毒性，生物惰性，不可降解
• 與浸油兼容

規(guī)格：

Ø微盤	35毫米
體積	2毫升
生長面積	3.5厘米2
Ø觀察區(qū)	21毫米
帶蓋/不帶蓋的高度	14/12毫米
底部：具有生物惰性表面的ibidi聚合物蓋玻片
生物惰性表面厚度	200納米
生物惰性表面材料	多元醇基水凝膠
蛋白質(zhì)涂層	不可能

生物惰性表面技術(shù)背后的原理

沒有細胞附著

生物惰性表面是與ibidi Polymer Coverslip＃1.5共價結(jié)合的薄的多元醇水凝膠層。與標準的超低附著力（ULA）涂層相反，Bioinert*不粘附，即使在長期實驗中也不允許任何生物分子的結(jié)合。因此，Bioinert技術(shù)在基于細胞的測定中提供了幾天甚至幾周的穩(wěn)定鈍化。

沒有細胞-底物相互作用

Bioinert創(chuàng)造了一種環(huán)境，在該環(huán)境中，細胞與細胞之間的相互作用比細胞與底物之間的相互作用更為重要。實際上，后者被*阻止了。Bioinert表面的穩(wěn)定性允許在同一盤上進行數(shù)天甚至數(shù)周的長期實驗，而不會粘附任何蛋白質(zhì)。即使您的細胞需要胎牛血清濃度高的培養(yǎng)基，Bioinert也會阻止任何細胞或蛋白質(zhì)粘附到表面。

沒有事先準備

生物惰性表面隨時可用。無需任何預(yù)水合步驟。一旦被緩沖液或細胞培養(yǎng)基浸濕，表面將自行膨脹。

無自發(fā)熒光

ibidi Polymer Coverslip的扁平，薄底材料和出色的光學(xué)質(zhì)量均可以實現(xiàn)高分辨率顯微鏡，而不會產(chǎn)生破壞性的自發(fā)熒光。

ibiTreat，未涂覆和生物惰性的表面比較

ibiTreat

優(yōu)異的細胞粘附力

• 貼壁細胞培養(yǎng)
• 可能有ECM涂層

親水的ibiTreat表面即使在沒有明確的蛋白質(zhì)涂層的情況下也能提供出色的細胞粘附性。但是，ECM蛋白包衣可以在ibiTreat上完成，沒有任何限制。ibiTreat表面非常適合培養(yǎng)不需要任何特殊涂層的貼壁細胞。

無涂層

弱細胞粘附

• 貼壁細胞培養(yǎng)
• 可能有ECM涂層

疏水的未涂層表面如果以前未使用ECM蛋白涂層，則細胞粘附力較弱。ECM蛋白包衣可以在未包被的表面上進行，沒有任何限制。未經(jīng)涂層的表面非常適合培養(yǎng)需要特定涂層的貼壁細胞。

生物惰性

無細胞粘附

• 懸浮細胞，細胞聚集體，球體，胚狀體（EB），類器官的培養(yǎng)
• 無法使用ECM涂層

親水性生物惰性表面會阻礙任何蛋白質(zhì)附著，從而抑制后續(xù)的細胞附著。與ibiTreat和未涂層表面不同，不可能進行涂層。生物惰性表面非常適合培養(yǎng)懸浮細胞和細胞聚集體。

應(yīng)用示例：使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和3D投影

使用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術(shù)從HT-1080 LifeAct細胞系中生成球狀體，然后將其轉(zhuǎn)移到35毫米高生物惰性的μ-Dish 顯微鏡中。

HT-1080 LifeAct橢球體的共聚焦激光掃描圖像。該圖像是一系列共焦部分的投影。彩虹色標度表示與蓋玻片表面的距離。暖色=靠近表面，冷色=遠離表面。

應(yīng)用示例：使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和FDA / PI染色

Bioinert表面非常適合球體和類器官的短期和長期3D培養(yǎng)。由于特異性和非特異性細胞的固定均被抑制，因此細胞被迫進入懸浮狀態(tài)??，從而能夠形成大小球體。為了評估生存力，使用標記活細胞的雙乙酸熒光素（FDA）和染色死細胞的碘化丙啶（PI）對細胞染色。

有關(guān)FDA / PI染色的更多詳細信息，請參閱我們的應(yīng)用筆記33，使用FDA和PI進行活/死染色（PDF）。

HepG2橢球體的共聚焦激光掃描部分。HepG2細胞的球狀體是用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術(shù)生成的，然后轉(zhuǎn)移到35毫米高生物活性的µ-Dish中。FDA（綠色）表示在球形外層的活細胞。PI（紅色）標記壞死球體中心內(nèi)的死細胞。比例尺為200 µm。

通過液體覆蓋法生成不同細胞系的球狀體，并將其轉(zhuǎn)移到35毫米的高密度碟中，用于FDA / PI染色和活細胞成像。

HepG2球體

HT1080橢球

HUVEC橢球

MCF7球體

如圖所示，F(xiàn)DA / PI染色的活細胞寬視野熒光成像可區(qū)分不同的細胞類型。FDA（綠色）表示在球形外層的活細胞。PI（紅色）標記壞死球體中心內(nèi)的死細胞。注意不同的球體形態(tài)，這取決于細胞類型。

FDA-PI染色的MCF-7細胞球的正視圖和側(cè)視圖。共聚焦激光掃描圖像是從FDA信號的連續(xù)共聚焦部分的覆蓋圖投影而來的。比例尺為100 µm。

應(yīng)用實例：培養(yǎng)不同表面的貼壁細胞

μ-盤35mm時，高生物惰性適用于各種貼壁細胞類型的培養(yǎng)（參見下圖）。

在ibiTreat表面上，所有貼壁細胞類型都顯示出很強的細胞貼壁性。由于只有血清蛋白涂層，因此在未涂層的表面上觀察到較弱的細胞粘附。在生物惰性表面上，細胞根本不附著，在大多數(shù)細胞類型中都可以觀察到球體形成。取決于特定細胞類型的細胞-細胞粘附，球體或多或少均勻地形成。

將不同類型的貼壁細胞分別接種在ibiTreat，未包被和Bioinert表面上。在沒有事先ECM蛋白包被的*生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞。播種后24小時拍攝圖像。相差顯微鏡，比例尺為300 µm。

 注：楊清辰發(fā)布