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賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司
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重組蛋白表達(dá)服務(wù)-賽爾瑞成大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)是較早被采用，也是目前掌握的較為熟悉的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌作為用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌，它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長繁殖快、成本低廉，可以快速大規(guī)格地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn)，而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng)。因此大腸桿菌是目前應(yīng)用廣泛的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)也更適合于分子量較小重組蛋白的制備。重組蛋白表達(dá)服務(wù)-賽爾瑞成的優(yōu)勢(shì)：1.20年的大腸桿菌原核蛋白表達(dá)制備的經(jīng)驗(yàn)；2.擁有多種自主優(yōu)化
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重組人BMP4的制備工藝說明如下：1.基因構(gòu)建與表達(dá)載體選擇基因合成或克隆：從人體組織中提取總RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）等技術(shù)獲得BMP-4的cDNA?；蛘吒鶕?jù)已知的BMP-4基因序列進(jìn)行人工合成。將獲得的BMP-4基因片段插入到合適的表達(dá)載體中，如質(zhì)粒載體，構(gòu)建重組表達(dá)載體。常用的表達(dá)載體包括pET系列、pcDNA系列等，這些載體通常含有啟動(dòng)子、選擇標(biāo)記基因和多克隆位點(diǎn)等元件，以便于后續(xù)的基因表達(dá)和篩選。表達(dá)宿主選擇：可以選擇大腸桿菌、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等作為表達(dá)宿主。
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以下是一些檢測(cè)重組人BMP4活性的方法：1.細(xì)胞水平檢測(cè)堿性磷酸酶活性檢測(cè)：BMP-4可以誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生堿性磷酸酶。將重組人BMP-4與特定的細(xì)胞系共同培養(yǎng)，如ATDC-5細(xì)胞等，在一定時(shí)間后，通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶的活性來反映BMP-4的活性。常用的方法是采用比色法或化學(xué)發(fā)光法等檢測(cè)堿性磷酸酶對(duì)特定底物的催化作用，從而確定其活性水平。細(xì)胞增殖和分化檢測(cè)：BMP-4能夠促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞等向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等方向增殖和分化。將重組人BMP-4作用于間充質(zhì)干細(xì)胞等靶細(xì)胞，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)后，通過
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重組蛋白純化是生物學(xué)研究中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，旨在從生物體中分離并純化目標(biāo)重組蛋白，以便研究其特定功能和結(jié)構(gòu)。重組蛋白純化的意義：1.提高蛋白質(zhì)純度：通過一系列分離和純化步驟，去除細(xì)胞裂解液中的雜質(zhì)和非目標(biāo)蛋白，從而獲得高純度的重組蛋白。2.保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性：高純度的重組蛋白有助于減少實(shí)驗(yàn)誤差，提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性。3.支持后續(xù)研究和應(yīng)用：純化的重組蛋白可用于結(jié)構(gòu)解析、功能研究、藥物篩選等多個(gè)領(lǐng)域的深入研究和應(yīng)用。以下是對(duì)重組蛋白純化要求的分析：1.親和標(biāo)簽的選擇：選擇親和標(biāo)簽時(shí)需要考慮的
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重組蛋白純化是生物制藥過程中的關(guān)鍵步驟，其目的在于從復(fù)雜的生物混合物中提取出高純度的目標(biāo)蛋白。重組蛋白純化的工藝過程涉及多個(gè)階段，以下是對(duì)這些階段的詳細(xì)介紹：1.樣品準(zhǔn)備預(yù)處理：在準(zhǔn)備好所有設(shè)備及耗材后，對(duì)目的蛋白進(jìn)行預(yù)處理，去除雜質(zhì)、組織、脂肪等，保證樣品的生物活性。裂解細(xì)胞：如果目標(biāo)蛋白存在于細(xì)胞內(nèi)，需要通過機(jī)械或化學(xué)方法裂解細(xì)胞，釋放出目標(biāo)蛋白。2.初步分離離心：利用離心技術(shù)將大部分細(xì)胞碎片和未破裂的細(xì)胞分離出去。過濾：通過過濾器進(jìn)一步去除較大的雜質(zhì)顆粒。3.層析法純化離子交換色譜：基于蛋
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細(xì)胞因子新品∣重組人/小鼠FGF8b & 重組人M-CSF
重組人/小鼠FGF8b重組人/小鼠成纖維細(xì)胞生長因子8b背景介紹成纖維細(xì)胞生長因子8（fibroblastgrowthfactor8，F(xiàn)GF8）是成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)家族的成員之一。在原腸胚時(shí)期和與細(xì)胞的早期分化過程中起著重要作用，并與腦、顱面器官、臟器、骨骼、四肢的形成有著重要的關(guān)系，是胚胎發(fā)育中重要的生長因子。在正常成人體內(nèi)，F(xiàn)GF8于腎臟、前列腺、睪丸、乳腺、骨髓和外周血白細(xì)胞中低水平表達(dá)。但在前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌與某些炎癥部位FGF8呈現(xiàn)過量表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，其對(duì)激素依 -
Human OSM（重組人抑瘤素M，Oncostatin M）-賽爾瑞成
HumanOSM（重組人抑瘤素M，OncostatinM）-賽爾瑞成背景介紹1986年Zarling等從PMA活化U937細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化到一種因子，這種因子有明顯抑制A375人黑素瘤細(xì)胞生長而命名為抑瘤素-M（oncostatinM,OSM)。OSM屬于白細(xì)胞介素-6家族成員,它主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生,例如活化的T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。OSM是一種參與調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、骨組織代謝、肝臟再生、誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的去分化、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生其他細(xì)胞因子和生長因子，并刺激血管生成的多效性分 -
細(xì)胞因子新品∣高活性重組人激活素A（recombinant human Activin A)
背景介紹激活素A（ActivinA）是一種功能強(qiáng)大的多功能細(xì)胞因子，屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）超家族的成員。ActivinA廣泛表達(dá)于各種細(xì)胞和組織中，具有很強(qiáng)的生物活性，作用廣泛，功能多樣，是迄今為止研究最多的激活素。ActivinA發(fā)揮作用時(shí)，首先與表面II型激活素受體（ActIIRA或ActRIIB）結(jié)合，隨后募集和磷酸化I型激活素受體（ActRI），磷酸化的ActRI又進(jìn)一步激活Smad2和Smad3。ActivinA主要通過Smad2/3蛋白發(fā)出信號(hào)，它們與Smad4形成復(fù)合物
