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賽爾瑞成（北京）生命科學技術有限公司
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大腸桿菌表達系統(tǒng)是使用很廣泛的蛋白質表達系統(tǒng)，擁有遺傳背景清楚、表達水平高、操作簡單、培養(yǎng)周期短等優(yōu)點，市售的大約30%的重組蛋白產品都是由大腸桿菌系統(tǒng)生產而來。
應用大腸桿菌表達系統(tǒng)時，為了得到符合科研和產業(yè)需求的重組蛋白目標產物，往往需要進行目標蛋白基因或菌種的突變，進行大量且繁瑣的表達菌種和高表達蛋白突變體的篩選工作。大腸桿菌作為宿主菌，表達的蛋白定位為胞內、胞外和周質腔三種。為獲得胞內蛋白或周質腔蛋白，往往需要對大腸桿菌進行破碎。雖然胞外蛋白可以借助信號肽的引導分泌到胞外，但蛋白的分泌效率通常不高，且很多時候，發(fā)酵中后期目標蛋白才開始運輸到胞外，導致絕大多數蛋白仍儲存在胞內，所以在進行蛋白制備時，為提高蛋白收率，仍需要進行細胞破碎。因此，破碎細胞是高通量篩選大腸桿菌菌種時必需的環(huán)節(jié)。
目前常用的破碎細胞的方法有超聲、均質機壓力、溶菌酶、反復冷凍、化學試劑等，但是這些方法不同程度存在破碎效率低、成本高、周期長、細胞破碎不均一等的缺點。賽爾瑞成開發(fā)的大腸桿菌專用破菌液，能夠高效、簡便的對大腸桿菌進行細胞破碎，特別適用于需要細胞破碎的高通量篩選。
★ 產品優(yōu)勢
1. 原位破菌，使用便捷，篩選成本更低
原位收集菌體，原位破菌，高通量操作。適用于各種型號培養(yǎng)板（如96孔板、48孔板、6孔板等），節(jié)省儀器成本、人力成本，節(jié)約時間，方便操作。
2. 組成成分溫和
不含還原劑、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分，對絕大多數蛋白結構和活性無影響。
★ 使用方法
1. 按常規(guī)方法，在培養(yǎng)板（如96孔板、48孔板、24孔板等）中接種培養(yǎng)大腸桿菌，至蛋白表達完成，即可使用孔板離心機離心收菌，棄去上清，盡量去除干凈；
2. 只需將孔板中收集的菌體按照孔板體積的五分之一左右加入破菌液，簡單混勻，置于-20°C以下冰箱，待冷凍結實。需要破菌時取出室溫自然解凍充分，然后按常規(guī)方法高速冷凍離心，收取破菌上清和菌體沉淀。
